|
بررسی اثر عصاره جفت انسانی بر تمایز استخوانی سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بندناف انسان
|
فاطمه پروینی فر    ، هانیه جعفری* ، احسان سیدجعفری |
| ، h-jafary@iau.ac.ir |
|
|
چکیده: (3 مشاهده) |
زمینه و هدف : سلول های بنیادی مزانشیمی با خاصیت خودنوسازی و تمایز به بافت های دیگر نقش کلیدی در پزشکی بازساختی ایفا می کند و عصاره جفت انسانی سرشار از فاکتور های رشد و اسیدآمینه ها و دیگر مواد مهم هستند . مطالعه حاضر با هدف بررسی اثر عصاره جفت بر تمایز استخوانی سلول های بنیادی مزانشیمی جهت دستیابی به یک روش درمانی در جهت ترمیم مشکلات استخوانی طراحی و اجرا شد.
روش ها :سلول های بنیادی مزانشیمی پس از استخراج از بند ناف و کشت ، با استفاده از عصاره جفت به سمت سلول های استخوانی تمایز داده شدند. جهت سنجش عدم سمیت و زنده مانی سلول ها از روش MTT استفاده شد. میزان پروتین عصاره جفت از روش بردفورد اندازه گیری شد. عصاره جفت از لحاظ آلودگی مایکوپلاسما به روش PCR ، آلودگی باکتری از روش Pour plate ، آلودگی اندوتوکسین از روش LAL و آلودگی فلزات سنگین از روش استفاده از پلاسما در دستگاه ICP مورد سنجش قرار گرفت. برای تشخیص مقدار هموگلوبین عصاره جفت نیز از روش درابکین استفاده شد. برای تایید تمایز و سنجش تراکم کلسیم (استخوانی شدن)از رنگ آمیزی الیزارین رد و برای ارزیابی میزان بیان ژن آلکالین فسفاتاز و ژن استئوکلسین از روش (Real time PCR) استفاده شد.. تمام آزمایش ها در سه تکرار مستقل انجام شد داده ها به صورت منفی و مثبت انحراف معیار گزارش شدند وتجزیه و تحلیل آماری با استفاده از ANOVA انجام شد.و داده های Real time PCR نیز با نرم افزار های LinRegPCR و REST-RGXLتحلیل شدند و مقادیر P< 0.05از نظر آماری معنی دار در نظر گرفته شد.
یافته ها : با انجام تست MTT مشخص شد که عصاره جفت نه تنها سمیت نداشته بلکه در مواجه با سلول های بنیادی باعث پیشرفت سریع تر و بهتر در عملکرد استخوانی شدن سلول ها شده است .همچنین با توجه به سطح معناداری و کشت ۱۴ روزه میزان ALP و رسوبات کلسیمی با اثر عصاره جفت به تدریج بیشتر شد. ژن استئوکلسین نیز در بالاترین رقت به مقدار ۱میلی لیتر عصاره جفت تفاوت معناداری نسبت به گروه کنترل نشان داد که ( P< 0.05(بوده و احتمال ۹۵ درصد انجام شده است. نتایج سنجش عصاره از لحاظ الودگی مایکوپلاسما ، اندوتوکسین، باکتری و فلزات سنگین نشان داد عصاره عاری از الودگی هاست و مقدار نهایی هموگلوبین نیز گویای درستی هموگلوبین زدایی از عصاره جفت می باشد.
نتیجه گیری : طبق یافته های به دست آمده از نمودارتست MTT و نمودار های Real time PCR مشخص شد که اثر عصاره جفت بر سلول های بنیادی در مسیر تمایز به سمت استخوانی شدن ،اثر تسریع کننده روند را داشته و با توجه به تفاوت های معناداری (P< 0.05) در رقت های مختلف از عصاره و با بیشتر شدن رقت ها و درنهایت بالاترین رقت مورد استفاده از عصاره جفت و در نمودار ژن استئوکلسین، ALP و کلسیم تفاوت معناداری (P< 0.05)با گروه کنترل را نشان داد که با احتمال بسیار بالایی اثرگزاری انجام شده است . از نتایج به دست آمده می توان گفت که احتمالا غنی بودن عصاره جفت از لحاظ داشتن فاکتور های رشد ، ویتامین ها و مواد معدنی باعث سرعت بخشیدن به روند تمایز سلول های بنیادی مزانشیمی به سمت سلول های استخوانی شده است.
|
|
| واژههای کلیدی: کلیدواژه ها : عصاره جفت، سلول های بنیادی مزانشیمی، تمایز، بند ناف، استخوان |
|
|
|
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
medicine, paraclinic
دریافت: 1405/3/22 | ویرایش نهایی: 1405/4/31 | پذیرش: 1405/4/31
|
|
|
|
|
|
|
| ارسال پیام به نویسنده مسئول |
|
|
|
| ارسال نظر درباره این مقاله |
|
|
|
_-_Copy.png)
.png){kind=logo}
