مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران ، fasihi.m@gmail.com
چکیده: (90 مشاهده)
سابقه و هدف: بروسلوزیس جزو شایعترین بیماریهای مشترک بین انسان و دام هستند که به سبب کاهش باروری و افزایش سقط جنین، ضررهای اقتصادی فراوانی را ایجاد میکند از این رو، نیاز به پیشگیری و تولید واکسن کارآمد لازم و ضروری است. هدف مطالعه حاضر تهیه نانو ساختار نیوزومی حاوی ایمنوژن سه ظرفیتی (TF، Bp26 و Omp31) بروسلا به عنوان کاندید نانو واکسن میباشد. مواد و روشها: در این مطالعه پس از طرحی سازه ایمونوژن توسط پایگاهها و نرم افزارهای بیوانفورماتیکی، به منظور ارزیابی ایمنی زایی پروتئین نوترکیب طراحی شده، کلون و بیان ژن در Escherichia coli BL21 (DE3) انجام پذیرفت. پروتئین استخراج شده از کشت سلولهای مذکور توسط ستون Ni-NTA مورد تخلیص قرار گرفت. برای تهیه نیوزوم های حامل ایمنوژن سه ظرفیتی از روش آبپوشانی لایه نازک استفاده شد و با استفاده از آزمونهای مشخصه یابیDLS وZetasizer مورد ارزیابی قرار گرفت. سپس میزان لود و رهایش ایمنوژن سه ظرفیتی محاسبه شد. نتایج: نتایج حاصل از مشخصه یابی، ساخت موفق نانوسامانه نیوزومی حاوی ایمنوژن سه ظرفیتی را تایید کرد. نتایج نشان داد که نیوزوم های تولید شده محدوده مناسبی از اندازه (100 نانومتر) قرار دارند. ایمنوژن سه ظرفیتی با راندمان بالایی (96/81%) در سامانه کپسوله شده است. رهایش ایمنوژن سه ظرفیتی از نانوسامانه نیوزومی بعد از 96 ساعت 97 درصد گزارش شد .علاوه بر این الگوی رهایش ایمنوژن سه ظرفیتی سامانه پوشش دهی شده کنترل شدهتر و اهستهتر بود. که این موضوع تاثیر مثبت نانوسامانه نیوزومی را تایید میکند. نتیجهگیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان می دهد استفاده از نیوزوم بعنوان عامل نانوواکسن نقش موثری در کنترل رهایش آنتیژن دارد و میتوانند به عنوان کاندید واکسن و افزایش پاسخ ایمنی حفاظتی علیه بروسلا مطرح باشند. اگرچه تحقیقات بیشتری به صورت بالینی در این زمینه ضروری می باشد