۲۳ نتیجه برای اسپرم
روح الله دهقانی، سیاوش تیرگری،
دوره ۲، شماره ۱ - ( ۱-۱۳۷۷ )
چکیده
سابقه و هدف: با توجه به بومی بودن کژدم ادنتوبوتوس دوریه در کشورهای ایران و پاکستان و اهمیت مطالعات بیولوژی و اپیدمیولوژی آن و این که تاکنون گزارشی از وضعیت آن در کشور ارایه نشده است و به منظور تعیین ویژگی های اسپرماتوفور کژدم ادنتوبوتوس دوریه صید گردیده در مناطق اصفهان و کاشان این پژوهش طی سال های ۷۳-۱۳۶۹ انجام گرفت.
مواد و روش ها: پژوهش به روش توصیفی بر روی ۶۰ کژدم بالغ صید شده از زیستگاه های طبیعی آن ها و نگهداری گردیده در آزمایشگاه صورت پذیرفت. اسپرماتوفورهای حاصل از جفت گیری کژدم های مذبور از نظر طول، عرض و ضخامت در قسمت های مختلف تنه، پایه، فلاژلوم بررسی و ثبت شد و فاصله اطمینانی اندازه های آن در جامعه برآورد گردید.
یافته ها: از ۳۰ جفت نمونه مورد بررسی، ۲۲ جفت گیری به عمل آمد. اندازه پایه تا فلاژلوم اسپرماتوفور ۱,۵±۸.۵، طول پایه ۰.۲۵±۲.۷۵، عرض ۰.۲۵±۱.۷۵ و ضخامت ۰.۱۵±۰.۸۵ میلی متر بود. تنه قسمت اصلی اسپرماتوفور به طول ۱.۵±۷.۵ میلی متر می باشد، قطر قسمت پهن تنه ۰.۴±۱.۴ میلی متر و اندازه فلاژلوم ۰.۵±۲.۵ میلی متر اندازه گیری شد.
نتیجه گیری: خصوصیات مورفومتری اسپرماتوفور کژدم ادنتوبوتوس دوریه با گونه های گزارش شده دیگر متفاوت بوده و پژوهش های بیشتری برای به دست آوردن تعداد اسپرم ها و شکل آن ها پیشنهاد می نماید.
مصطفی قانعی، بیتا کیمیایی، علی اکبر وثوقی،
دوره ۵، شماره ۳ - ( ۷-۱۳۸۰ )
چکیده
سابقه و هدف: با توجه به شیوع بتاتالاسمی ماژور و مشکل هیپوگنادیسم در این بیماران و تاثیر منفی دیسفرال بر میزان روی آن ها و نظر به دخالت عنصر روی در اسپرماتوژنز و برای پاسخ به این سوال که آیا کمبود روی با مشکل بلوغ جنسی ارتباط داد یا خیر و به منظور تعیین تاثیر روی درمانی بر محور هیپوفیز-گناد این تحقیق در مبتلایان به بتاتالاسمی ماژور دارای کمبود روی در سال ۱۳۷۴ انجام گرفت.
مواد و روش ها: تحقیق به روش کارآزمایی بالینی دوسوکور بر روی ۲۳ بیمار دختر و پسر در گروه سنی ۱۴ تا ۱۸ سال صورت پذیرفت. بیماران به طور تصادفی به گروه های شاهد و مورد تقسیم شدند و در گروه مورد به مدت سه ماه کپسول ۲۵ میلی گرمی و در گروه شاهد دارد بخار آن تجویز گردید. بیماران از عدم بلوغ رنج می بردند و همگی کمبود روی داشتند. قبل از تجویز روی و سه ماه بعد از تجویز، پس از گرفتن هورمون های پایه آزمون LHRH انجام گرفت و پاسخ هورمونی در دقیقه های صفر، سی و شصت بررسی گردید.
یافته ها: ۴ بیمار از مطالعه حذف شدند و تحقیق بر روی ۱۹ نفر شامل ۹ نفر در گروه شاهد و ۱۰ نفر در گروه مورد به عمل آمد میزان روی سرم از µgr/dl ۶±۱۵ به µgr/dl ۴۹±۱۲۰ در گروه تحت درمان با روی افزایش یافت (P<۰,۰۰۱)، در حالی که در گروه دارونما افزایشی مشاهده نگردید. هورمون های FSH با LH پایه پس از درمان در دو گروه تفاوتی نشان نداد و همچنین پاسخ به گنادها به تحریک LHRH در دو گروه تفاوتی نداشت.
نتیجه گیری و توصیه ها: درمان با روی در مدت سه ماه تاثیری در پاسخ محور هیپوفیز-گناد ندارد. بررسی های بیشتری لازم است تا مشخص نماید آیا کمبود روی در دراز مدت ضایعه غیر قابل برگشت ایجاد می نماید و یا این که در انسان روی به تنهایی نمی تواند در انسان عامل هیپوگنادیسم باشد.
حسین نیکزاد، همایون نادریان، محمد پوراحمدی،
دوره ۶، شماره ۳ - ( ۷-۱۳۸۱ )
چکیده
سابقه و هدف : وازکتومی یکی از روشهای مناسب جهت جلوگیری از بارداری و کنترل جمعیت است. باتوجه به گزارشات ضد و نقیض در ارتباط با تأثیرات وازکتومی روی بافت بیضه و روند اسپرماتوژنزیس و اهمیت بررسی نقش عوامل ایجادکننده تغییرات در بیضه، به منظور تعیین تأثیر دو تکنیک جراحی وازکتومی بسته و باز روی بافت بیضه و نقش افزایش فشار ئیدروستاتیک در ایجاد تغییرات، این تحقیق در سال ۱۳۷۹ در گروه علوم تشریح کاشان انجام گرفت.
مواد و روشها : در این تحقیق تجربی۲۰ سر رت نژاد Sprague Dawely در سنین ۸ الی ۱۲ هفتگی بطور تصادفی انتخاب و در دو گروه وازکتومی بسته و باز تقسیم شدند: در گروه وازکتومی بسته مجرای دفران راست آنها تحت عمل وازکتومی بسته و طرف چپ آنها تحت عمل Sham و در گروه وازکتومی باز که مجرای دفران راست آنها تحت عمل وازکتومی باز و طرف چپ آنها تحت عمل Sham قرار گرفت. بیضه موشها چهار ماه پس از عمل جراحی برداشته شد. وزن و حجم بیضهها و تغییرات ظاهری آنها مشخص شد و پس از فیکس کردن، آمادهسازی، برشگیری و رنگآمیزی تحت میکروسکوپ نوری تغییرات بافتی و قطر مجاری منیساز، درصد حجمی مجاری طبیعی و غیرطبیعی، درصد حجمی بافت بینابینی، تعداد سلولهای اسپرماتوگونیا، اسپرماتوسیت پاکیتن، اسپرماتید گرد، اسپرماتید بالغ سرتولی و نسبت اسپرماتید گرد به سلول سرتولی در گروه مورد و شاهد و همچنین بین دو روش جراحی وازکتومی تعیین گردید و با روش آمــاری – test t مورد مقایسه قرار گرفتند.
یافتهها : بررسی هیستولوژیک نشان داد که بافت بیضه در گروههای شاهد ظاهر کاملاً طبیعی دارند ولی بیضه گروههای مورد در هر دو روش تغییرات متفاوتی را نشان دادند. در مجاری آسیب دیده تغییراتی از جمله جدا شدن سلولهای نابالغ از اپیتلیوم، شکاف و ایجاد واکوئل در اپیتلیوم، چینخوردگی و ضخیمشدن غشای دور مجاری و حذف سلولهای جرم مشاهده گردید. بررسی کمی مجاری با ظاهر طبیعی نشان داد که تعداد سلولهای اسپرماتوگونیا، اسپرماتوسیت پاکیتن، اسپرماتید گرد، اسپرماتید طویل، نسبت اسپرماتید گرد به سرتولی، قطر مجاری، وزن و حجم بیضه بین گروه مورد و شاهد در هر دو روش جراحی اختلاف معنیداری وجود دارد. در بقیه متغیرها اختلاف معنیداری دیده نمیشود. مقایسه پارامترهای فوق از نظر دو روش جراحی هیچ اختلاف معنیداری را نشان ندادند.
نتیجهگیری و توصیهها: تغییرات ایجاد شده در بیضههای گروه وازکتومی بسته و باز اختلاف معنیداری ندارند و وازکتومی با انتهای باز و بسته روی بافت بیضه تأثیر میگذارد و نقش افزایش فشار ئیدروستاتیک در گروه وازکتومی بسته در ایجاد تغییرات کمتر بوده و پیشنهاد میگردد در آینده مطالعات گستردهتری در ارتباط با بررسی نقش عوامل دیگر از جمله افزایش تیتر آنتیبادی آنتیاسپرم در ایجاد تغییرات و ساختار غشای دور مجاری منیساز از نظر اولترااستراکچر و ایمنوهیستوشیمی مورد بررسی دقیق قرار گیرد.
منصور ابراهیمی،
دوره ۸، شماره ۳ - ( ۷-۱۳۸۳ )
چکیده
سابقه و هدف: با توجه به آلودگی منابع مختلف به فلزات سنگین و عوارض شناخته شده آنها و کاستیهایی که در تحقیقات قبلی برای سنجش پارامترهای موثر بر حرکت اسپرمها وجود داشته است، این تحقیق به منظور تعیین تاثیر غلظتهای مختلف جیوه بر پارامترهای حرکت و اولترامورفولوژیک اسپرم ماهی انجام گرفت.
مواد و روشها: تحقیق به روش تجربی روی اسپرم ۶ ماهی با وزن متوسط ۷۳ ± ۱۰۱۸ گرم انجام گرفت. اسپرمها در غلظتهای ۰، ۱/۰، ۱، ۵، ۱۰، ۵۰ و ۱۰۰ پیپیام جیوه مجاورت داده شدند و تاثیر این تماس با جیوه بر پارامترهای حرکتی اسپرمها بر حسب میکرومتر بر ثانیه تعیین و مورد قضاوت آماری قرار گرفت. به علاوه بررسی های مرفولوژی با استفاده از میکروسکوپ الکترونی اسکن نیز انجام گرفت.
یافتهها: تحقیق نشان داد که جیوه تغییرات مرفولوژی قابل ملاحظهای را در اسپرمها ایجاد نکرد، ولی قطع کامل دم در غلظتهای ۵ پیپیام جیوه به بالا مشاهده گردید. در اثر تماس اسپرم حتی با غلظت ۱/۰ پیپیام اختلاف معنیداری در عوامل موثر بر حرکت اسپرمها نسبت به گروه کنترل مشاهده شد.
نتیجهگیری و توصیهها: سم فلز جیوه حتی در غلظتهای کم نیز ممکن است بر حرکت اسپرمها تاثیر بگذارد. به علاوه از طریق مهار سیستمهای تنفسی سلول میتواند تغییرات مرفولوژی قابل مشاهدهای را ایجاد کند. بنابراین توقف کامل و سریع فعالیت حرکتی اسپرمها در اثر تماس با جیوه باعث میشود که اسپرم قادر به یافتن تخمک، ورود به آن و بارور کردن آن نباشد.
زهره سادات، فرزانه صابری، معصومه عابدزاده،
دوره ۱۱، شماره ۱ - ( ۱-۱۳۸۶ )
چکیده
سابقه و هدف: پرهاکلامپسی یکی از عوامل اصلی منجر به فوت زنان باردار در سر تا سر جهان میباشد و بر اساس تئوری ناسازگاری ایمنی، ایجاد تحمل بر علیه آنتیژنهای پدر در اثر تماس طولانیمدت با اسپرم علیه پرهاکلامپسی محافظت میکند . با توجه به تناقضات موجود در این زمینه، مطالعه ی حاضر با هدف تعیین ارتباط مدت تماس اسپرم با سرویکس قبل از حاملگی و میزان خطر پرهاکلامپسی در زنان باردار مراجعهکننده به زایشگاه دکتر شبیهخوانی کاشان در سال ۱۳ ۸۵-۱۳۸۴ انجام شد.
مواد و روشها: تحقیق از نوع موردی ـ شاهدی بر روی ۱۵۰ مادر که دارای پرهاکلامپسی بودند (گروه مورد) و ۱۵۰ مادر که فاقد پرهاکلامپسی بودند (گروه شاهد) انجام شد. تشخیص پرهاکلامپسی بر اساس وجود فشار خون میلیمتر جیوه یا بیشتر و پروتئینوری ۱+ و یا بیشتر در نمونه ادرار تصادفی داده شد. نمونههای هر دو گروه به لحاظ سایر عوامل تاثیرگذار بر پرهاکلامپسی مشابه بودند. در هر دو گروه طول مدت تماسهای جنسی قبل از حاملگی که اسپرم و سرویکس در تماس بوده، میزان استفاده از روشهای ممانعتکننده از تماس اسپرم و سرویکس (روشهای پیشگیری سدی) و طول مدت استفاده از این روشها ثبت و مورد مقایسه قرار گرفت. جهت تجزیه و تحلیل اطلاعات از آزمونهای آماری t-test, c ², Mann-Whitney ا ستفاده شد.
نتایج: یافتههای تحقیق نشان داد اختلاف هر دو گروه از نظر سایر عوامل مرتبط با پرهاکلامپسی و طول مدت تماس به لحاظ آماری معنیدار نبود. میانگین مدت تماس اسپرم و سرویکس قبل از حاملگی در دو گروه مورد و شاهد به ترتیب ۸/۱۳ ± ۴/۱۲ ماه و ۱۴ ± ۴/۱۱ ماه بود و آزمون آماری من ـ ویتنی این اختلاف را به لحاظ آماری معنیدار نشان نداد. آزمون آماری کای دو ( c ۲ ) نشان داد بین میزان استفاده از روشهای ممانعتکننده از تماس اسپرم و سرویکس (روشهای پیشگیری سدی) در دو گروه اختلاف معنیداری وجود ندارد (۸۰ نفر در گروه مورد و ۸۸ نفر در گروه شاهد). میانگین و انحراف معیار مدت استفاده از روشهای سدی در دو گروه مورد و شاهد به ترتیب ۹/۲۱ ± ۸/۲۵ ماه و ۷/۲۳ ± ۷/۲۸ ماه بود و آزمون آماری من ـ ویتنی نشان داد مدت استفاده از روشهای سدی در دو گروه اختلاف معنیداری ندارد.
نتیجهگیری: نتایج تحقیق نشان داد مدت تماس اسپرم و سرویکس قبل از حاملگی، میزان و مدت استفاده از روشهای ممانعتکننده از تماس اسپرم و سرویکس قبل از حاملگی در دو گروه مورد و شاهد تفات معنیداری ندارد و احتمالا این عوامل در پیدایش پرهاکلامپسی بیتاثیر هستند، لذا تحق ی قات بیشتر و وسیعتر در این زمینه توصیه میشود.
جعفر آی، اسدا... ظریفکار، سعید خاتم ساز، حسین شهریاری،
دوره ۱۱، شماره ۲ - ( ۴-۱۳۸۶ )
چکیده
سابقه و هدف: با توجه به اینکه انسان در معرض تشعشعات گاما ناشی از رادیوتراپی و پرتوهای X تشخیصی قرار میگیرد، بررسی اثرات تشعشعات گاما بر بافتهای مختلف انسان ضروری به نظر میرسد. هدف از این تحقیق بررسی اثرات تشعشعات گاما بر فرآیند اسپرماتوژنز در موش صحرایی بالغ و نقش اپی نفرین ب ه عنوان محافظت کننده است.
مواد و روش ها: در این بررسی تجربی دستگاه مولد اشعه ی گاما با شدت ۲۵ گری به کار گرفته شد و تعداد ۱۲۰ راس موش صحرایی نژاد Wistar به عنوان مدل آزمایشگاهی در ۴ گروه مساوی انتخاب گردیدند . ۱- گروه تیمار با اپی نفرین، ۲-گروه تیمار با سرم نمکی (کنترل)، ۳ - گروه تیمار با اپی نفرین و تشعشعات گاما، ۴- گروه تیمار با سرم نمکی و تشعشعات گاما با شدت ۲۵ گری. تزریق اپی نفرین به مقدار sub lethal dose (۱ml/kg) به صورت زیرجلدی در ناحیه ی شکم صورت پذیرفته است. تعداد ۶۰ راس موش صحرایی برای ب ه دست آوردن Lethal dose (LD۵۰) مورد آزمایش قرار گرفت و LD۵۰ اپینفرین به میزان ml/kg ۲ تعیین شد. در پایان پس از تشریح و بیرون آوردن بیضه ی حیوانات و عملیات مربوط به آماده سازی اسلاید و مطالعه ی آنها، تعداد سلول های اسپرماتوگونی، تعداد سلول های اسپرماتوسیت اولیه، تعداد سلول های اسپرماتید ، تعداد اسپرماتوزوئیدها و تعداد سلول های بینابینی و سلول های سرتولی مورد بررسی و شمارش قرار گرفت.
نتایج: یافت ه ها نشان داد که در گروه تیمار با اشعه ی گاما با شدت ۲۵ گری لوله های اسپرم ساز از هم فاصله گرفتند و همچنین تعداد سلول های اسپرماتوگونی و سلول های اسپرماتید و اسپرم به صورت معنی دار (۰۵/۰ p< ) کاهش یافت. تعداد سلولهای اسپرماتوسیت اولیه و میزان ترشحات در لولههای اسپرمساز در گروه تیمار با گاما در مقایسه با گروه کنترل افزایش معنیداری (۰۵/۰ p< ) مشاهده شد.
نتیجه گیری: در پایان، گروه تیمار با اپی نفرین و تشعشعات گاما این عوارض را نشان نداد و عملکرد اپی نفرین به عنوان یک م حافظت کننده به خوبی مشخص شد. به نظر می رسد اپی نفرین با کاهش جریان خون و ایجاد هیپوکسی، سلول ها و بافت ها را از اثرات زیانبار رادیکال های آزاد که تحت ت ا ثیر تشعشعات گاما حاصل می شوند، حفظ می کند.
مینا رمضانی، محمد علی خلیلی، مریم ادیب،
دوره ۱۴، شماره ۱ - ( ۱-۱۳۸۹ )
چکیده
سابقه و هدف: امروزه انجماد اسپرم انسان به عنوان یک تکنیک رایج برای درمان ناباروری به کار می رود. مشخص شده است که انجماد به روش های مختلف کمابیش سبب کاهش تحرک و قابلیت حیات اسپرم در مردان بارور می شود. اما، هنوز اثر روش انجماد شیشه ای بر روی پارامترهای اسپرم مردان نابارور بررسی نشده است. هدف از این مطالعه، بررسی اثر انجماد شیشه ای بر پارامترهای حیاتی و میزان آپوپتوز اسپرم در مردان نابارور است.
مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی نمونه های مایع منی ۱۷ بیمار مراجعه کننده به مرکز تحقیقاتی درمانی ناباروری یزد، پس از خود انزالی جمع آوری و آنالیز آن طبق استانداردهای سازمان جهانی بهداشت انجام گرفت. سپس از نمونه ها اسمیر تهیه شده و لام ها برای رنگ آمیزی تانل و تعیین درصد مرگ سلولی فیکس شدند. مقداری از مایع منی توسط کرایولوپ برداشته شده و در نیتروژن مایع منجمد شد. پس از گذشت حداقل ۷ روز از انجماد، نمونه ها ذوب شده و پارامترهای حیاتی (تحرک، مورفولوژی، قابلیت حیات و شمارش) آن بررسی شدند. داده های قبل و بعد از انجماد توسط آزمون های t زوجی و ویل کاکسون مقایسه گردیدند.
نتایج: درصد تحرک پیشرونده بعد از انجماد شیشه ای به طور معنی داری کاهش یافت. همچنین، کاهش معنی داری در قابلیت حیات و مورفولوژی اسپرم و افزایش معنی داری در میزان آپوپتوز مشاهده شد. اما، پارامتر شمارش تغییر معنی داری نداشت.
نتیجه گیری: نتایج مطالعه حاضر نشان داد که انجماد شیشه ای بر روی پارامترهای حیاتی و میزان آپوپتوز اسپرم مردان نابارور اثر سوء دارد. هر چند میزان آپوپتوز ایجاد شده توسط این روش نسبت به سایر روش های انجماد کمتر است.
مصطفی اکبرزاده خیاوی، سید علی رحمانی، تاج الدین اکبرزاده خیاوی، اعظم صفری،
دوره ۱۸، شماره ۲ - ( ۱-۱۳۹۳ )
چکیده
سابقه و هدف: نواحی حاوی فاکتورهای آزوسپرمی ( AZF ) واقع در بازوی بلند کروموزوم Y دارای ژنهایی است که نقش و عملکرد خاص آنها در اسپرماتوژنز بهطور کامل مشخص نشده است. از این رو، شناخت ارتباط بین ریز حذفهای نواحی AZF با ناباروری در مردان، تشخیص، درمان و مشاوره ژنتیک را مقدور میسازد.
مواد و روشها: مطالعه توصیفی-تحلیلی حاضر بر روی ۴۷ مرد نابارور مبتلا به آزوسپرمی با دلایل غیر انسدادی مراجعه کننده به بخش ناباروری بیمارستان الزهراء تبریز و کاریوتایپ نرمال انجام گردید. غربالگری مولکولی ناحیه AZF بر روی DNA ژنومی خون محیطی انجام گردید. تکنیک Multiplex PCR و دو مجموعه از پرایمرهای STS برای تشخیص ریز حذف های نواحی AZF و توالیهای ویژه بر روی کروموزوم Y استفاده گردید.
نتایج: از بین ۴۷ مرد نابارور، ۱۷ بیمار (۱۷/۳۶ درصد) دارای ریزحذفهای کروموزوم Y در نواحی AZFc و AZFd بودند (۰۵/۰>P) . از این ۱۷ نفر ۱۴ بیمار در ناحیه AZFc و دو بیمار تواما در دو ناحیه AZFc+d و یک بیمار در ناحیه AZFd دارای ریزحذف بودند. نتایج نشان داد ریزحذف های نواحی AZF تاثیر معنیداری بر بروز آزواسپرمی در مردان نابارور دارد.
نتیجهگیری: تجزیه و تحلیل ریزحذفهای کروموزوم Y بهعنوان یک آزمایش مولکولی با اهمیت برای کسب اطلاعات ژنتیکی قابل اعتماد در مردان مبتلا به ناباروری، قبل از استفاده از تکنیکهای کمک باروری توصیه میشود؛ این امر به کاهش هزینهها و مشکلات این تکنیک کمک خواهد نمود.
پیمان رحیمی فیلی، پرویز تاجیک، شیوا شفیعی، معصومه دودل، فاطمه اربابی،
دوره ۱۹، شماره ۱ - ( ۱-۱۳۹۴ )
چکیده
سابقه و هدف: ایجاد شرایط بهینه جهت کشت سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه، به کشف تمامی مکانیسم های مولکولی دخیل در اسپرماتوژنز و دستورزی در ژن ها کمک شایانی می نماید. هدف از انجام مطالعه ی حاضر بررسی تاثیر داربست نانو-رشته پلی ال لاکتیک اسید بر تکثیر سلول های اسپرماتوگونی منجمد یخگشایی شده گوساله در محیط آزمایشگاه می باشد.
مواد و روش ها: استخراج و تخلیص سلول ها از بیضه گوساله ۳ تا ۵ ماهه با روش هضم آنزیمی دو مرحله ای و حذف تمایزی صورت پذیرفت. سلول ها پس از انجماد و یخ گشایی در دو گروه مجزا کشت داده شدند: ۱- گروه شاهد: کشت سلول به صورت ساده ۲- گروه تیمار: کشت سلول ها بر روی نانورشته. سلول ها در محیط کشت DMEM حاوی FBS ۵ درصد و در حضور ng/ml GDNF۴۰ به مدت ۲ هفته کشت داده شدند. ارزیابی کلونی های اسپرماتوگونی در روزهای ۴، ۷، ۱۰ و ۱۳ کشت صورت پذیرفت. بیان ژن های (PLZF, GFRα-۱, VASA, Itgα۶, BCL۶) با روش RT-PCR در روز پایانی کشت در تمامی گروه ها ارزیابی شد.
نتایج: درصد حیات سلول ها پس از جداسازی و افزودن محلول انجماد به ترتیب ۲/۴±۸۷/۴ و ۳/۱±۸۱/۸ درصد بود که پس از یخ گشایی این میزان به ۷/۱±۶۵ درصد کاهش یافت (۰/۰۱>P). مساحت کلونی های مشتق از اسپرماتوگونی گروه تیمار در مقایسه با گروه شاهد در روز ۱۳ افزایش معنیدار داشت (۰/۰۵>P). در پایان کشت تمامی ژن های اختصاصی اسپرماتوگونی بیان شد.
نتیجه گیری: آن گونه که از نتایج حاصل از این مطالعه برمی آید نانورشته پلی ال لاکتیک اسید، ریزمحیطی مناسب در جهت کشت سلول های منجمد- ذوب شده اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه فراهم می آورد.
علی اصغر مقدم، پیمان رحیمی فیلی، زهرا نیکوصفت، سجاد ضرغامی،
دوره ۲۰، شماره ۲ - ( ۳-۱۳۹۵ )
چکیده
سابقه و هدف: سلول های بنیادی اسپرماتوگونی کاربردهای فراوانی در طب تولید مثلی و زیستفناوری دارند. جهت نگهداری طولانیمدت این سلول ها از تکنیک انجماد استفاده می شود. هدف از مطالعه حاضر، بررسی تاثیر غلظت های مختلف FBS و ساکاروز روی درصد حیات اسپرماتوگونی بره بود.
مواد و روش ها: سلول های بیضه بره های نابالغ با روش هضم آنزیمی دو مرحله ای استخراج شده و با حذف تمایزی خالصسازی گردید. سپس، سلول ها به ۶ گروه آزمایشی تقسیم بندی شدند. در گروه های ۱، ۲ و ۳ از FBS با غلظت ۱۰ درصد و از ساکاروز به ترتیب با غلظت های ۰/۰۷، ۰/۱۴ و ۰/۲۱ مولار و در گروه های ۴، ۵ و ۶ از FBS با غلظت ۲۰ درصد و از ساکاروز به ترتیب با غلظت های ۰/۰۷، ۰/۱۴ و ۰/۲۱ مولار استفاده شد. درصد حیات سلول ها در گروه های مختلف آزمایشی در سه مرحله مختلف (بلافاصله پس از استخراج، متعاقب افزودن محیط انجماد و پس از یخگشایی) مورد سنجش قرار گرفت. جهت شناسایی سلولهای اسپرماتوگونی تیپ A از رنگآمیزی ایمنوسیتوشیمی علیه PGP۹,۵ استفاده شد.
نتایج: نتایج این مطالعه نشان می دهد مواد محافظ در برابر انجماد اثرات سمی روی اسپرماتوگونی بره ندارند. هم چنین، درصد زندهمانی این سلول ها در محیط حاوی ۱۰ درصد FBS به طور معنی داری بیشتر از درصد زنده مانی آنها در محیط حاوی ۲۰ درصد FBS بود. علاوه بر این، افزایش غلظت های ساکاروز (۰/۰۷، ۰/۱۴ و ۰/۲۱) تاثیر مثبتی روی درصد زنده مانی اسپرماتوگونی نداشت.
نتیجه گیری: در مجموع به نظر میرسد استفاده از محیط انجماد حاوی ۱۰ درصد DMSO توام با ۱۰ درصد FBS و ۰/۰۷ مولار ساکاروز برای انجماد اسپرماتوگونی بره مناسب است.
عطااله زندی، پیمان رحیمیفیلی، علیاصغر مقدم، زهرا نیکوصفت،
دوره ۲۰، شماره ۳ - ( ۵-۱۳۹۵ )
چکیده
سابقه و هدف: سلول های بنیادی اسپرماتوگونی با حفظ تعادل بین خودنوسازی و تمایز سبب تداوم روند اسپرماتوژنز می شوند. هدف از انجام مطالعه حاضر بررسی تاثیر غلظت های مختلف تستوسترون بر کلونیزایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند میباشد.
مواد و روشها: سلول های اسپرماتوگونی بیضه گوسفند نابالغ با روش هضم آنزیمی دو مرحلهای جدا و بهروش حذف تمایزی خالص سازی شدند. سپس، به مدت ۱۳ روز به چهار روش تیمار شدند: گروه شاهد شامل کشت ساده سلول های اسپرماتوگونی در محیط DMEM حاوی ۱ درصد آنتی بیوتیک و ۵ درصد FBS بود و به تیمارهای ۱، ۲ و ۳ علاوه بر محیط بالا به ترتیب ۶۰، ۱۲۰ و ۲۴۰ میکروگرم بر میلی لیتر تستوسترون اضافه شد. تعویض محیط کشت هر ۷۲ ساعت انجام شد. ماهیت سلول ها با استفاده از رنگآمیزی ایمونوسیتوشیمی علیه آنتیژن PGP۹,۵ تائید گردید. در نهایت درصد حیات سلولها بلافاصله پس از جداسازی، و هم چنین تعداد و مساحت کلونی های تشکیل شده در روزهای ۵، ۹ و ۱۳ پس از کشت به وسیله میکروسکوپ معکوس بررسی شد.
نتایج: درصد حیات سلول های اسپرماتوگونی بعد از جداسازی ۳/۶۳±۸۶/۷۷ درصد بود. کاهش تعداد و مساحت کلونی های اسپرماتوگونی تیمار ۲ و ۳ نسبت به کنترل و تیمار ۱ معنی دار بود (<۰/۰۵P). به علاوه، تعداد و مساحت کلونیها در روز ۱۳ در مقایسه با روزهای ۵ و ۹ افزایش معنیداری داشت (<۰/۰۵P).
نتیجهگیری: نتایج مطالعه حاضر نشان می دهد تستوسترون در القاء کلونیزایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه نقش مثبتی نداشته و با افزایش دوز باعث کاهش تعداد و مساحت کلونی ها در محیط کشت میشود.
مهران پردل، جواد بهارارا، الهه امینی،
دوره ۲۱، شماره ۲ - ( ۳-۱۳۹۶ )
چکیده
سابقه و هدف: تاکنون گیاهان زیادی در درمان ناباروری مورد استفاده قرار گرفته اند. مطالعات نشان دادهاند که کرایزین به عنوان یک متابولیت فعال موجود در شهد برخی گیاهان عملکرد تولید مثلی حیوانات را بهبود می بخشد. بنابراین، هدف این پژوهش بررسی اثر کرایزین بر روی سلول های بنیادی اسپرمساز موش کوچک آزمایشگاهی است.
مواد و روش ها: در این پژوهش تجربی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی موش سوری در محیط DMEM/F۱۲ کشت شده با غلظت های مختلف کرایزین (۵/۲، ۵، ۱۰، ۲۰ و ۴۰ میکروگرم بر میلی لیتر) به مدت ۶ و ۱۲ روز تیمار شدند. سپس، سمیت توسط آزمون های MTT، اکردین اورنج/ پروپودیوم ایداید، DAPI و ظرفیت آنتی اکسیدانی توسط آزمون DCF-DA مورد بررسی قرار گرفت.
نتایج: کرایزین در غلظت های زیر ۵ میکروگرم سمیت معنی داری بر سلول های بنیادی اسپرمساز اعمال نکرد (۰/۰۵>P). در مقابل زیستایی این سلول ها تحت تاثیر دوزهای ۱۰، ۲۰ و۴۰ میکروگرم بر میلی لیتر کرایزین در روز ۶ پس از کشت به میزان ۳۰، ۴۵ و ۵۶ درصد (۰۵/۰P<* و ۰۰۱/۰P<***) و در روز ۱۲ به میزان ۴۴، ۵۶ و ۶۵ درصد کاهش معنی دار یافت (۰/۰۵<P، ۰/۰۱<P و ۰/۰۰۱P<). نتایج آزمون DCF-DA نشان داد که کرایزین در غلظت های ۵، ۵/۲ میکروگرم دارای ۸۰ درصد خاصیت آنتی اکسیدانی است.
نتیجه گیری: کرایزین در غلظت های پایین می تواند اثر حفاظتی روی سلول های بنیادی اسپرمساز موش سوری داشته باشد که از طریق افزایش زیستایی سلول ها، کاهش آپوپتوز سلول ها و مهار رادیکال های آزاد اثر خود را ایفا می کند.
زهره طالبی یزدآبادی، کیانوش درمیانی، محبوبه فروزانفر، لیانا لاچینانی، مرضیه تولایی، محمد حسین نصر اصفهانی،
دوره ۲۳، شماره ۳ - ( ۳-۱۳۹۸ )
چکیده
سابقه و هدف: توقف رونویسی در طی دو مرحله از فرآیند اسپرماتوژنز اتفاق می افتد: بار نخست در اسپرماتوسیت هایی که وارد میوز اوّلیه می شوند و دیگری در اسپرماتیدهای کروی در حال طویلشدن. این مراحل متوقف شدن رونویسی نیازمند تنظیمات گسترده ی ترجمه هستند. بنابراین وجود کنترل بعد از رونویسی برای تنظیم بیان ژن ضروری به نظر می رسد. در مواردی که مکانیسم های کنترل پس از رونویسی عملکرد غیرطبیعی داشته باشند، فرآیند اسپرماتوژنز مختل می شود. پروتئین های متصل شونده به RNA نقش مهمّی در این مکانیسم ها دارند. یک گروه از این پروتئینها متعلق به خانواده Musashi هستند که نقش مهمّی در اسپرماتوژنز دارند و هدف این مطالعه ی مروری، بررسی اهمیت این خانواده از پروتئین ها در طی فرآیند اسپرماتوژنز می باشد.
مواد و روش ها: این مطالعه یک مطالعه مروری است و انتخاب مقالات از طریق پایگاه های اطلاعاتی Google scholar،PubMed وScopus بر اساس واژگان کلیدی صورت گرفت. سپس تمام مقالات انگلیسی زبان مرتبط بین سال های ۲۰۱۸-۱۹۹۴ مورد بررسی قرار گرفتند.
نتایج: مطالعات متعددی نشان دادهاند که Musashi ۱ در ابتدای اسپرماتوژنز نقش مهمّی در تکثیر اسپرماتوگونی ها و گنوسایت ها دارد، در حالی که در اواخر اسپرماتوژنز، این Musashi ۲ است که در تمایز اسپرماتوسیت ها و اسپرماتیدها نقشی حیاتی ایفا می نماید.
نتیجه گیری: پروتئین های Musashi در فرآیند اسپرماتوژنز نقش حیاتی دارند. در مدل های تراریخت که بیان پروتئین های Musashi در آنها کاهش یافته یا متوقف شده است، نقایص پاتولوژیکی شدیدی از جمله غیرطبیعیبودن مورفولوژی اسپرم، آسیب DNA و کاهش قدرت باروری مشاهده شد.
مهسا شیرانی، مهران نوری، غلامرضا عسکری،
دوره ۲۳، شماره ۴ - ( ۵-۱۳۹۸ )
چکیده
سابقه و هدف: یکی از مهمترین عوامل مؤثر در ایجاد ناباروری آسیب اکسیداتیو به سلول های بیضه توسط رادیکال های آزاد می باشد.-N استیلسیستئین (NAC) از جمله ترکیبات آنتیاکسیدان است که قادر به بازیافت رادیکال های آزاد، جلوگیری از آسیب بافتی و همچنین محافظت از اسپرم می باشد. هدف از انجام این مطالعه خلاصه کردن اطلاعات کارآزمایی های بالینی انجام شده در رابطه با بررسی اثر NAC بر روی پارامترهای استرس اکسیداتیو، تعداد، حرکت و مرفولوژی اسپرم در مردان نابارور است.
مواد و روش ها: با جست وجو در پایگاه های علمی PubMed، Google Scholar، Science Direct، Scopus و Web of Science بااستفاده از کلیدواژه هایN-Acetyl-L-cysteine, NAC, Infertility, Sterility مطالعات منتشرشده در بین سال های ۲۰۱۸-۱۹۹۰ استخراج شدند. از میان انواع مطالعات استخراجشده، فقط کارآزمایی های بالینی به مطالعه، وارد و انواع دیگر ازجمله: مطالعات مقطعی، آینده نگر، گذشته نگر، مروری و... خارج شدند. بنابراین معیار ورود به مطالعه، مکملیاری N-استیلسیستئین در نظر گرفته شد.
نتایج:NAC به عنوان بخشی از گلوتاتیون، در بازسازی ذخایر و افزایش فعالیت آنتی اکسیدانی نقش دارد و به دلیل وجود گروه سولفیدریل در آن، توانایی پاکسازی رادیکال های آزاد از طریق واکنش با گونه های فعال اکسیژن دار را دارا میباشد. از سویی دیگر، افزایش تولید گونه های فعال اکسیژن در اثر عدم تعادل بین مواد پراکسید و آنتی اکسیدان، بر روی غشای پلاسمایی اسپرم، می تواند اثر منفی بر عملکرد اسپرم داشته باشد.
نتیجه گیری: در بیشتر مطالعات تأثیر مثبت مکمل NAC بر روی پارامترهای اسپرمی، ظرفیت آنتیاکسیدانی و آنزیمهای آنتیاکسیدانی اثبات شده است، اما به دلیل کمبودن مطالعات، نیاز به کارآزمایی های بیشتری می باشد.
حسن حسنی بافرانی، حامد حداد کاشانی، فاطمه شابه پور،
دوره ۲۴، شماره ۳ - ( ۴-۱۳۹۹ )
چکیده
سابقه و هدف: انجماد نمونه منی انسان بهعنوان یک روش مؤثر در تکنیکهای کمکباروری (ART) محسوب میشود. در طی روند انجماد، سلولهای اسپرم در معرض استرسهای فیزیکی و شیمیایی قرار میگیرند و در نتیجه آسیب به آکسونم، افزایش نقایص مورفولوژیکی قطعه میانی و کاهش تحرک اسپرم ایجاد میگردد. به این ترتیب در این مطالعه، تأثیرات آنتیاکسیدانهای ترهالوز و رزوراترول بر پارامترهای اسپرم در طی فرآیندهای انجماد و ذوب مورد ارزیابی قرار میگیرد.
مواد و روشها: مطالعه مقطعی بر روی ۴۰ نمونه طبیعی مایع منی که در ۷ گروه تقسیم شده بودند، انجام گرفت. اثرات آنتیاکسیدانهای مذکور بر پارامترهای اسپرم با روشهای آنالیز کامپیوتری (CASA) و ارزیابی کروماتین اسپرم (SCD) بررسی گردید. لازم به ذکر است۰/۰۵ P<از نظر آماری معنیدار در نظر گرفته شد.
نتایج: گروه ۳ (تیمار محیط انجمادی و شستشو با ترهالوز ۱۰۰ میلی مولار)، بیشترین درصد تحرک، سالم بودن غشای آکروزوم و بینقص بودن غشای پلاسمایی را در مقایسه با گروه کنترل نشان داد و پس از ذوب نیز دارای DNA سالم بیشتری بود و کمتر بقای اسپرم را دچار مشکل میکرد.
نتیجهگیری: با توجه به نتایج میتوان بیان داشت که بهطور کلی نمونههای دارای ترهالوز میزان کیفیت سیمن را بهبود میبخشند و حتی بعد از ذوب هم در حفظ تحرک اسپرم نقش دارند. رزوراترول هم در غلظتهای پایین اثرات مفیدی روی بقای اسپرم دارد و بهعنوان آنتیاکسیدانی قوی، ROS را مهار میکند.
سمانه فرجی، لیلا راشکی قلعه نو، محسن شرفی، مریم هزاوه ای، مهدی توتونچی، عبدالحسین شاهوردی، روح الله فتحی،
دوره ۲۴، شماره ۵ - ( ۷-۱۳۹۹ )
چکیده
سابقه و هدف: آنتیژنهای اختصاصی اسپرم (SPAG)، نقش مهمی در بروز سرطانهای مختلف، مانند سرطان سینه، ریه، کبد و مثانه دارند. همچنین SPAGها اهمیت بالایی در عملکردهای اسپرم، همچون تحرک دارند. با اینحال بهنظر میرسد انجماد اسپرم بهعنوان یکی از روشهای کمکباروری میتواند بر بیان این ژنها تأثیرگذار باشد. هدف مطالعه حاضر، ارزیابی اثر انجماد، بر بیان SPAGهای ۵ و ۹ اسپرم انسانی میباشد.
مواد و روشها: در مطالعه تجربی حاضر، ۱۲ نمونه نرمال از نظر پارامترهای طبیعی اسپرم، از منی مردان مراجعهکننده به پژوهشگاه رویان جمعآوری گردید و با روش سانتریفیوژ گرادیان، غلظت اسپرمهای دارای تحرک مؤثر بالا جداسازی شد. نمونهها به دو گروه غیرانجمادی (گروه کنترل) و گروه انجمادی تقسیم شدند. پس از انجماد به روش سریع و نگهداری برای سه روز در تانک نیتروژن، نمونهها زیر شیر آب سرد ذوب شدند و بهمدت دو ساعت در انکوباتور دارای CO۲ قرار گرفتند. استخراج RNA در هر دو گروه با استفاده از ترایزول صورت گرفت و ارزیابی ژنهای SPAG۹ و SPAG۵ با روش Real-time PCR انجام شد.
نتایج: براساس تجزیه و تحلیل آماری، بیان SPAG۵ در گروه انجمادی نسبت به گروه کنترل کاهش معنیداری داشت (۰۵/۰P≤)؛ در مقابل تفاوت معنیداری در بیان ژن SPAG۹ بین گروه کنترل و انجمادی مشاهده نشد.
نتیجهگیری: با در نظر گرفتن شوک حاصل از سرما در آینده سلول، کاهش بیان معنیدار SPAG۵ در گروه انجمادی میتواند بیانگر بروز اثرات احتمالی آن در جنین حاصل باشد.
محدثه احمدی، پیمان رحیمی فیلی، علی اصغر مقدم، صمد علی محمدی،
دوره ۲۵، شماره ۱ - ( ۱-۱۴۰۰ )
چکیده
سابقه و هدف: سلول های بنیادی اسپرماتوگونی (SSCs: Spermatogonial Stem Cells)، اساس اسپرماتوژنز هستند؛ زیرا ظرفیت خودنوسازی و تمایز به اسپرماتوزوآ را دارند. انجماد، متداولترین روش حفظ طولانیمدت SSCs است. هدف از مطالعه حاضر، بررسی اثرات محافظت کنندگی در برابر انجماد سرم جنین گاو (FBS: Fetal Bovine Serum) و ترهالوز بر SSCs بز بود.
مواد و روش ها: SSCs از بیضه بز نابالغ توسط هضم آنزیمی و حذف تمایزی جداسازی شدند. سلول ها به ۹ گروه تقسیم شدند. گروه کنترل شامل SSCs بدون عوامل محافظت کننده انجماد بود. در گروههای تیمار ۱، ۲، ۳ و ۴؛ غلظت ۱۰ درصد FBS و غلظت های مختلف ترهالوز (۰، ۵۰، ۱۰۰ و ۲۰۰ میلی مول) و در گروه های تیمار ۵، ۶، ۷ و ۸؛ غلظت ۲۰ درصد FBS و غلظت های مختلف ترهالوز (۰، ۵۰، ۱۰۰ و ۲۰۰ میلی مول) به ترتیب استفاده شد. میزان زندهمانی سلول ها بلافاصله پس از جداسازی، افزودن مواد محافظ انجماد و یخ گشایی ارزیابی شد. ماهیت سلولها توسط رنگآمیزی ایمنوسیتوشیمی علیه آنتیژن PGP۹,۵ تأیید شد. دادهها توسط آزمون آنالیز واریانس یک طرفه تحلیل گردیدند.
نتایج: میزان زندهمانی SSCs در تیمارهای مختلف، متعاقب افزودن FBS و ترهالوز بلافاصله پس از جداسازی، مشابه سلول های زنده بود. علاوهبر این، بیشترین میزان زندهمانی SSCs پس از یخ گشایی در محیط انجماد حاوی ۱۰ درصد FBS و ۲۰۰ میلیمول ترهالوز مشاهده شد (۰/۰۵>P).
نتیجه گیری: نتایج نشان داد که انجماد در FBS ۱۰ درصد توأم با ۲۰۰ میلیمول ترهالوز به عنوان روش مؤثر برای حفاظت از انجماد SSCs بز عمل می کند.
اسماعیل سعدین، طاهره حق پناه، سیدنورالدین نعمت اللهی ماهانی، مسعود عزت آبادی پور، تانیا دهش،
دوره ۲۵، شماره ۵ - ( ۹-۱۴۰۰ )
چکیده
سابقه و هدف: هدف از انجام این مطالعه، بررسی اثرات محافظتی احتمالی آسکوربیکاسید بر سمیت ناشی از منکوزب بر پارامترهای اسپرم و ساختار بیضه فرزندان نسل اوّل موش بود.
مواد و روشها: در این مطالعهی تجربی، موشهای مادهی باردار نژاد NMRI بهطور تصادفی به چهار گروه شامل: کنترل، شم، منکوزب (۵۰۰ میلیگرم بر کیلوگرم) و آسکوربیکاسید + منکوزب (۱۰۰ میلیگرم بر کیلوگرم آسکوربیکاسید + ۵۰۰ میلیگرم بر کیلوگرم منکوزب) تقسیم شدند. تیمارها از روز اوّل بارداری شروع شد و تا پایان شیردهی ادامه داشت. فرزندان نر هر گروه تا سنّ بلوغ (۱۰-۸ هفته) نگهداری شدند. وزن بیضه چپ اندازهگیری و ساختار آن مطالعه شد. سپس اپیدیدیم چپ فرزندان جدا و پارامترهای اسپرم (تعداد، حیات، تحرک و مورفولوژی) مطالعه شد.
نتایج: کاهش معنیداری در پارامترهای اسپرم گروه منکوزب نسبت به گروه کنترل و شم مشاهده شد (۰۰۱/۰> P) و مصرف همزمان آسکوربیکاسید اثرات منفی ناشی از منکوزب را بهبود بخشید. همچنین پارامترهای بیضه شامل وزن، شاخص گنادوسوماتیک، قطر لولههای اسپرمساز، نمره جانسون، و نیز تعداد سلولهای زایا از جمله اسپرماتوگونی، اسپرماتوسیت، اسپرماتید و سرتولی در گروه منکوزب در مقایسه با گروههای کنترل و شم کاهش معناداری را نشان داد (۰۱/۰> P)؛ در حالیکه مصرف همزمان آسکوربیکاسید اغلب این پارامترهای آسیبدیدهی بیضه و اسپرم را بهبود بخشید.
نتیجهگیری: این مطالعه نشان داد که مصرف آسکوربیکاسید در دوران بارداری و شیردهی اثر محافظتی در مقابل اثرات مخرب منکوزب بر پارامترهای اسپرم و ساختار بیضه فرزندان نر نسل اوّل موش دارد.
الهام قجری، شقایق کیانی، نوشین نادری، مرضیه تولائی، محمد حسن مشکی باف، محمد حسین نصر اصفهانی،
دوره ۲۶، شماره ۶ - ( ۹-۱۴۰۱ )
چکیده
سابقه و هدف: اسپرماتوژنز فرآیندی است که به تولید و تمایز اسپرم منجر میشود. در طی این فرآیند، مسیرهای مولکولی و متابولیسمهای مختلفی درگیر هستند. «چرخه ۱- کربن» بهعنوان یکی از مهمترین چرخههای متابولیکی که شامل دو چرخه فولات و متیونین و مسیر ترانسسولفوراسیون میباشد، شناخته شده است. این چرخه در متیلاسیون DNA و RNA، تراکم و بلوغ DNA و حفظ تعادل آنتیاکسیدانی در اسپرم نقشهای ضروری و حیاتی دارد. در این مطالعه مروری، به اهمیت چرخه ۱- کربن در فرآیند اسپرماتوژنز پرداخته شده است.
مواد و روشها: با استفاده از چندین واژگان کلیدی، مطالعات مربوط از پایگاههای PubMed وScholar Google و Science Direct بین سالهای ۱۹۹۳ تا ۲۰۲۱ به زبان انگلیسی بررسی شدند که اطلاعات ۶۹ مقاله منتخب، استخراج گردید.
نتایج: اختلال در متابولیسم چرخه ۱- کربن مانند مسیر ترانسسولفوراسیون، روند متیلاسیون مجدد، کمبود فولات یا کوبالامین و وجود پلیمورفیسم تکنوکلئوتیدی ژن MTHFR واریانت C۶۷۷T، میتواند بر متیلاسیون DNA و RNA و سلامت DNA اسپرم تأثیرگذار باشد. افزایش غلظت هموسیستئین بهویژه در افراد با کمبود فولات، با افزایش استرس اکسیداتیو و کاهش آنتیاکسیدانها در سلول همراه است که میتواند بر عملکرد و توانایی باروری اسپرم مؤثر باشد.
نتیجهگیری: ممکن است تقویت چرخه ۱- کربن با فولات و دیگر ریزمغذیها بتواند با فعالکردن آنزیمهای دخیل در مسیر ترانسسولفوراسیون و کاهش غلظت هموسیستئین، به بهبود پارامترهای اسپرمی و پتانسیل باروری منجر شود.
میلاد ترابی، پیمان رحیمی، علی اصغر مقدم،
دوره ۲۷، شماره ۲ - ( ۳-۱۴۰۲ )
چکیده
سابقه و هدف: هدف از انجام مطالعه حاضر ارزیابی تأثیر فاکتور رشد شبهانسولینی-۱ بر تکثیر سلولهای اسپرماتوگونی بز در محیط آزمایشگاه بود.
مواد و روشها: بیضه بز نابالغ از کشتارگاه گرفته و جداسازی سلولهای اسپرماتوگونی به روش هضم دومرحلهای انجام شد. سلولهای اسپرماتوگونی در محیط کشت DMEM حاوی ۵ درصد سرم گوساله جنینی و ۱ درصد آنتیبیوتیک (پنیسیلین - استرپتومایسین) کشت داده شد و به گروه شاهد و تیمارهای ۱، ۲ و ۳ بهترتیب مقادیر ۰، ۱۰، ۴۰ و ۱۰۰ نانوگرم بر میلیلیتر فاکتور رشد شبهانسولین-۱ اضافه گردید. دادهها با آزمون آنالیز واریانس یکطرفه و آزمون تکمیلی توکی در سطح ۵ درصد آنالیز شدند. جهت شناسایی سلولهای اسپرماتوگونی از رنگآمیزی ایمونوهیستوشیمی علیه آنتیژن PGP۹,۵ و همچنین آزمون PCR- RTنشانگرهای THY-۱، VASA، UCHL-۱(PGP۹,۵)، plzf و OCT-۴ استفاده شد.
نتایج: تعداد کلونیهای سلولهای اسپرماتوگونی در تیمار ۳ در مقایسه با گروه شاهد و دیگر تیمارها در تمامی روزهای ارزیابی (۴، ۷ و ۱۰)، بهطور معنیداری بیشتر بود. مساحت کلونیهای تیمار ۱ در روزهای ۷ و ۱۰ کشت، اختلاف معنیداری را با تیمار ۲ و گروه شاهد نشان داد. همچنین مساحت کلونیهای تیمار ۳ در روزهای ۴، ۷ و ۱۰ پس از کشت نسبت به گروه شاهد، تیمار ۱ و تیمار ۲ بهطور معنیداری بیشتر بود. سلولهای جداشده تمامی نشانگرهای سطحی، مربوط به سلولهای بنیادی را بیان کردند.
نتیجهگیری: برای کشت کوتاهمدت سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی بز در شرایط آزمایشگاه، افزودن فاکتور رشد شبهانسولین-۱ با دوز ۱۰۰ نانوگرم بر میلیلیتر پیشنهاد میشود.