[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره مجله :: شماره جاری :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
بخش‌های اصلی
صفحه اصلی::
اطلاعات نشریه::
بانک‌ها و نمایه‌ها::
آرشیو مجله و مقالات::
برای نویسندگان::
اخلاق در پژوهش::
برای داوران::
تسهیلات پایگاه::
تماس با ما::
::
Basic and Clinical Biochemistry and Nutrition
..
DOAJ
..
CINAHL
..
EBSCO
..
IMEMR
..
ISC
..
جستجو در پایگاه

جستجوی پیشرفته
..
دریافت اطلاعات پایگاه
نشانی پست الکترونیک خود را برای دریافت اطلاعات و اخبار پایگاه، در کادر زیر وارد کنید.
..
enamad
..
:: دوره 21، شماره 1 - ( دوماه نامه 1396 ) ::
جلد 21 شماره 1 صفحات 34-28 برگشت به فهرست نسخه ها
بررسی میزان ترشح خارج سلولی پپتید ضد سرطان VEGF111b در سلول های انسانی HEK-293
مرتضی صادقی* ، زهره حجتی
مرکز تحقیقات ژنتیک انسانی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران ، ms.sadeghi@yahoo.com
چکیده:   (3492 مشاهده)

سابقه و هدف: VEGF111b یک ایزوفرم جدید از فاکتورهای رشد اندوتلیال عروقی (VEGF) است که اخیرا به­ عنوان یک داروی ضد سرطان مطرح شده است. هدف مطالعه حاضر بررسی میزان ترشح این پروتئین از دیواره سلول­ های HEK293 به­ منظور تولید تجاری این فاکتور نوترکیب است.

مواد و روش ها: توالی VEGF111b توسط نرم­افزار OLIGO و اطلاعات ژن بانک NCBI طراحی و داخل وکتور pBUD.cE4.1کلون شد. وکتور نوترکیب pBUD.VEGF111b با استفاده از کیت لیپوفکتامین به داخل سلول­ های HEK293 ترانسفکت شد. تولید VEGF111b 48 ساعت بعد از ترانسفکشن در عصاره لیز سلولی توسط وسترن بلاتینگ و آنتی ­بادیHuman anti-VEGF  بررسی شد. میزان ترشح VEGF111b در عصاره لیز سلولی و محیط کشت سلولی به روش ELISA اندازه گیری گردید.

نتایج: کلونیتگ صحیح قطعهVEGF111b  در وکتور pBUD.cE4.1 توسط هضم آنزیمی و ژل الکتروفورز تائید شد. مشاهده باند شارپ 12 کیلودالتن در نتایج وسترن بلات عصاره لیز سلولی نشان­گر تولید پپتید نوترکیب VEGF111b در سلول­ های HEK293 بود. نتایج الایزا در جذب نوری 450 نانومتر برای  VEGF111bدر محیط کشت سلولی و عصاره لیز سلولی به­ ترتیب برابر با 2/81±19/20 pg/ml و  pg/ml7/42± 32/87 بود. و در نمونه ­های کنترل منفی بیان VEGF-111b مشاهده نشد.

نتیجه گیری: یافته های این مطالعه نشان­گر قابلیت بالای انتقال و ترشح VEGF111b از دیواره سلول­ های HEK293 به محیط کشت سلولی بدون شکستگی و هضم پروتئولیتیکی است. به ­نظر می­ رسد تولید تجاری این پپتید دارویی و تخلیص از محیط کشت سلولی HEK293 با بازدهی بالا امکان­ پذیر باشد.

واژه‌های کلیدی: فاکتور رشد اندوتلیال عروقی A، ترشح، HEK293
متن کامل [PDF 338 kb]   (1169 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: عمومى
دریافت: 1395/12/8 | ویرایش نهایی: 1396/4/28 | پذیرش: 1395/12/8 | انتشار: 1395/12/8
فهرست منابع
1. Makrilia N, Lappa T, Xyla V, Nikolaidis I, Syrigos K. The role of angiogenesis in solid tumors: an over-view. Eur J Intern Med 2009; 20(7): 663-71.
2. Drevs J. VEGF and angiogenesis: imlications for breast cancer therapy. EJC Supplements 2008; 6: 7-13.
3. Shibuya M. Structure and dual function of vascular endothelial growth factor receptor-1 (Flt-1). Int J Biochem Cell Biol 2001; 33(4): 409–20.
4. Bates DO, Cui TG, Doughty JM, Winkler M, Sugiono M, Shields JD, et al. VEGF165b, an inhibitory splice variant of vascular endothelial growth factor, is down-regulated in renal cell carcinoma. Cancer Res 2002; 62(14): 4123–31.
5. Bates DO, MacMillan PP, Manjaly JG, Qiu Y, Hudson SJ, Bevan HS, et al. The endogenous anti-angiogenic family of splice variants of VEGF, VEGFxxxb, are down-regulated in pre-eclamptic placentae at term. Clin Sci (Lond) 2006; 110(5): 575 –85.
6. Vincenti V, Cassano C, Rocchi M, Persico G. Assignment of the vascular endothelial growth factor gene to the human chromosome 6p21.3. Circulation 1996; 93(8): 1493–5.
7. Koch S, Tugues S, Li X, Gualandi L, Claesson-Welsh L. Signal trans‌duction by vascular endothelial growth factor receptors. Biochem J 2011; 437(2): 169–83.
8. Eichmann A, Simons M. VEGF signaling inside vascular endothelial cells and beyond. Curr Opin Cell Biol 2012; 24(2): 188–93.
9. Carmeliet P, Ruiz de Almodovar C. VEGF ligands and receptors: implications in neurodevelopment and neurodegeneration. Cell Mol Life Sci 2013; 70(10): 1763–78.
10. Huez I, Bornes S, Bresson D, Creancier L, Prats H. New vascular endothelial growth factor isoform generated by internal ribosome entry site-driven CUG translation initiation. Mol Endocrinol 2001; 15(12): 2197–210.
11. Meiron M, Anunu R, Scheinman EJ, Hashmueli S, Levi BZ. New isoforms of VEGF are translated from alternative initiation CUG codons located in its 5’UTR. Biochem Biophys Res Commun 2001; 282(4): 1053–60.
12. Tee MK, Jaffe RB. A precursor form of vascular endothelial growth factor arises by initiation from an upstream in-frame CUG codon. Bio‌chem J 2001; 359 (Pt 1): 219–26.
13. Houck KA, Leung DW, Rowland AM, Winer J, Ferrara N. Dual regula‌tion of vascular endothelial growth factor bioavailability by genetic and proteolytic mechanisms. J Biol Chem 1992; 267(36): 26031–7.
14. Ruhrberg C, Gerhardt H, Golding M, Watson R, Ioannidou S, Fujisawa H, et al. Spatially restricted patterning cues provided by heparin-binding VEGF-A control blood vessel branching morphogenesis. Genes Dev 2002; 16(20): 2684–98.
15. Gu F, Li X, Kong J, Pan B, Sun M, Zheng L, et al. VEGF111b, a new member of VEGFxxxb isoforms and induced by mitomycin C, inhibits angiogenesis. Biochem Biophys Res Commun 2013; 441(1): 18–24
16. Dvorak HF. VPF/VEGF and the angiogenic response. Semin Perinatol 2000; 24(1): 75–8.
17. Raab S, Plate KH. Different networks, common growth factors: shared growth factors and receptors of the vascular and nervous system. Acta Neuropathol 2007; 113(6): 607-26.
18. Takahashi H, Shibuya M. The vascular endothelial growth factor (VEGF)/VEGF receptor system and its role under phisiological and pathological conditions. Clin Sci 2005; 109(3): 227-41.
19. Emamgholipour S, Bandehpour M, Shabani P, Maghen L, Yaghmaee B, Kazemi B. Mutagenesis in se-quence encoding of human factor VII for gene therapy of hemophilia. DARU 2009; 17(4): 294-8.
20. Rennel E, Waine E, Guan H, Schüler Y, Leenders W, Woolard J, et al. The endogenous antiangiogenic VEGF isoform, VEGF165b inhibits human tumour growth in mice. Br J Cancer 2008; 98(7): 1250–7.
21. Stalmans I, Ng YS, Rohan R, Fruttiger M, Bouche A, Yuce A, et al. Arteriolar and venular patterning in retinas of mice selectively expressing VEGF isoforms. J Clin Invest 2002; 109(3): 327–36.
22. Gerhardt H. VEGF and endothelial guidance in angiogenic sprouting. Organogenesis 2008; 4(4): 241–6.
23. von Degenfeld G, Banfi A, Springer ML, Wagner RA, Jacobi J, Ozawa CR, et al. Microenvironmental VEGF distribution is critical for stable and functional vessel growth in ischemia. FASEB J 2006; 20(14): 2657–9.
24. Kerbel RS. Tumor angiogenesis: past, present and the near future. Carcinogenesis 2000; 21(3): 505-15.
25. Walter DH1, Hink U, Asahara T, Van Belle E, Horowitz J, Tsurumi Y, et al. The in vivo bioactivity of vascular endothelial growth factor/vascular permeability factor is independent of N-linked glycosylation. Lab Invest 1996; 74(2): 546–56.
26. Chen E, Hermanson S, Ekker SC. Syndecan-2 is essential for angio‌genic sprouting during zebrafish development. Blood 2004; 103(5): 1710–9.
27. Wijelath ES, Rahman S, Namekata M, Murray J, Nishimura T, Mostafavi-Pour Z, et al. Heparin-II domain of fibronectin is a vascular endothelial growth factor-binding domain: enhancement of VEGF biological activity by a singular growth factor/matrix protein synergism. Circ Res 2006; 99(8): 853–60.
28. Krilleke D, DeErkenez A, Schubert W, Giri I, Robinson GS, Ng YS, et al. Molecular mapping and functional characterization of the VEGF164 heparin-binding domain. J Biol Chem 2007; 282(38): 28045–56.
29. Ruiz de AC, Coulon C, Salin PA, Knevels E, Chounlamountri N, Poesen K. Matrix-binding vascular endothelial growth factor (VEGF) isoforms guide granule cell migration in the cerebellum via VEGF receptor Flk1. J Neurosci 2010; 30(45): 15052–66.
30. Chen S, Chakrabarti R, Keats EC, Chen M, Chakrabarti S, Khan ZA. Regulation of vascular endothelial growth factor expression by extra domain B segment of fibronectin in endothelial cells. Invest Ophthalmol Vis Sci 2012; 53(13): 8333–43.
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Sadeghi M, Hojati Z. Evaluation of anticancer peptide VEGF111b secretion in HEK293 human cells. Feyz Med Sci J 2017; 21 (1) :28-34
URL: http://feyz.kaums.ac.ir/article-1-3277-fa.html

صادقی مرتضی، حجتی زهره. بررسی میزان ترشح خارج سلولی پپتید ضد سرطان VEGF111b در سلول های انسانی HEK-293. مجله علوم پزشکی فيض. 1396; 21 (1) :28-34

URL: http://feyz.kaums.ac.ir/article-1-3277-fa.html



Creative Commons License
This open access journal is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial ۴.۰ International License. CC BY-NC ۴. Design and publishing by Kashan University of Medical Sciences.
Copyright ۲۰۲۳© Feyz Medical Sciences Journal. All rights reserved.
دوره 21، شماره 1 - ( دوماه نامه 1396 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علوم پزشکی فیض Feyz Medical Sciences Journal
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 46 queries by YEKTAWEB 4660