Feyz Medical Sciences Journal
مجله علوم پزشکی فيض
Feyz
Medical Sciences
http://feyz.kaums.ac.ir
29
journal29
1029-7855
2008-9821
fa
jalali
1397
9
1
gregorian
2018
12
1
22
6
online
1
fulltext
fa
بررسی جهش های اگزون 4 ژن فنیلآلانین هیدروکسیلاز در بیماران مبتلا به فنیل کتونوری در استان گیلان با استفاده از PCR-Sequencing
Investigation of exon 4 mutations of phenylalanine hydroxylase gene in phenylketonuria patients in Guilan Province using PCR-sequencing
medicine, paraclinic
medicine, paraclinic
پژوهشي
Research
<div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:9.0pt;">سابقه و هدف:</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> فنیل­کتونوری (</span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PKU</span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">) یک اختلال متابولیک اتوزومال مغلوب و هتروژن است که به­ طور عمده ناشی از موتاسیون­ هایی در ژن فنیل­آلانین هیدروکسیلاز (</span></span></strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PAH</span></span></span></em><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">) کبدی می­ باشد. الگوی توزیع موتاسیون­ ها در ژن </span></span></strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PAH</span></span></span></em><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> خاص هر جمعیت است. تاکنون هیچ گزارشی از تحلیل مولکولی فنیل کتونوری در این جمعیت یافت نشده است. هدف از این مطالعه شناسایی موتاسیون­ های ژن </span></span></strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PAH</span></span></span></em><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> در اگزون 4، در بیماران </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PKU</span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> در استان گیلان و مقایسه آن با مطالعات صورت گرفته در سایر بخش­ های ایران بود. </span></span></strong><br>
<strong><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:9.0pt;">مواد و روش ­ها:</span></span></span></strong><strong><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> در این مطالعه توصیفی-مقطعی طی یک دوره یک­ساله، تعداد 25 بیمار </span></span></span></strong><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PKU</span></span></span><strong><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> و غیرخویشاوند </span></span></span></strong><strong><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">(1 تا 21 سال) </span></span></span></strong><strong><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">از نواحی مختلف استان گیلان شناسایی شدند. پس از اخذ نمونه خون از افراد و جداسازی </span></span></span></strong><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">DNA</span></span></span><strong><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">، قطعات </span></span></span></strong><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">DNA</span></span></span><strong><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> شامل اگزون 4 ژن </span></span></span></strong><em><span dir="LTR" style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PAH</span></span></span></em><strong><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> و نواحی اینترونی اطراف آن توسط واکنش زنجیره­ای پلیمراز تکثیر یافته و تعیین توالی شد.</span></span></span></strong><br>
<strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:9.0pt;">نتایج:</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> در این مطالعه جهش</span></span></strong> <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">IVS4+5G>T</span></span></span> <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">(10 درصد) </span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">شناسایی شد. این </span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">جهش در دو بیمار </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PKU</span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> به­ صورت هموزیگوت و</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> در یک بیمار به­ صورت هتروزیگوت</span></span></strong> <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">مشاهده شد. این بیماران به ­ترتیب فنوتیپ ­های </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;"> mPKU</span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">و </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;"> cPKU</span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">داشته و والدین آنها خویشاوندان درجه سوم بودند. به ­علاوه پلی­ مورفیسم ­های</span></span></strong> <span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">IVS4+47C>T</span></span></span> <strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">(28 درصد) </span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">و </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">IVS3-22C>T</span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> (8 درصد)</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> نیز مشخص گردید.</span></span></strong><br>
<strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:9.0pt;">نتیجه ­گیری:</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> بررسی موتاسیون­ ها ابزار مفیدی برای تشخیص مولکولی بیماری </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PKU</span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> و تعیین ناقلین در این جمعیت است. به­ علاوه، برای دست­یابی به طیف کامل موتاسیون­ های این ژن در بیماران </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PKU</span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> استان گیلان نیاز به بررسی 12 اگزون دیگر می­ باشد.</span></span></strong></div>
<div style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong>Background: </strong>Phenylketonuria (PKU) is a heterogeneous and autosomal recessive metabolic disorder that is mainly caused by mutations in the hepatic phenylalanine hydroxylase (<em>PAH</em>) gene. Distribution pattern of mutations in the <em>PAH </em>gene are specific to each population. To date, no reports of phenylketonuria molecular analysis have been found in this population. The aim of this study was to identify <em>PAH</em> mutations within exon 4 in PKU patients in Guilan Province and compare it with the studies in other parts of Iran.<br>
<strong>Materials and Methods: </strong>In this cross-sectional and descriptive study, 25 unrelated PKU patients (age range, 1-21 years) were identified from different regions of Guilan Province during a one-year period. After collecting blood samples and DNA extraction, the DNA fragments containing the exon 4 of the PAH gene and its flanking intronic sequences were amplified and sequenced.<br>
<strong>Results:</strong> In this study, IVS4+5G>T mutation (10%) was identified. This mutation was found in two homozygous PKU patients and one heterozygous patient; they had mPKU and cPKU phenotypes, respectively and their parents were third degree relatives. In addition, IVS4+47C>T (28%) and IVS3-22C>T (8%) polymorphisms were also detected.<br>
<strong>Conclusion:</strong> Investigation of mutations in the PAH gene can be a useful tool for molecular detection of the PKU disease and carrier detection in this population. Moreover, the other 12 remaining exons need to be analyzed to obtain the full spectrum of mutations of this gene among the PKU patients in Guilan Province.</span></div>
جهش, فنیل آلانین هیدروکسیلاز, فنیل کتونوری, اگزون 4, PCR-Sequencing
Guilan Province, PKU, PAH, mutation, exon4. .PCR-Sequencing.
595
601
http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2502-2&slc_lang=fa&sid=1
Neda
Pourvatan
ندا
پوروطن
neda.purvatan@gmail.com
2900319475328460023989
2900319475328460023989
No
Department of Cellular and Molecular Biology, Faculty of Biological Sciences, Tonekabon Branch, Islamic Azad University, Tonekabon, I. R. Iran.
گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، واحد تنکابن، دانشگاه آزاد اسلامی، تنکابن، ایران
Zeinab
Khazaei -Koohpar
زینب
خزائی کوهپر
dz.khazaei@gmail.com
2900319475328460023990
2900319475328460023990
Yes
Department of Cellular and Molecular Biology, Faculty of Biological Sciences, Tonekabon Branch, Islamic Azad University, Tonekabon, I. R. Iran.
گروه زیست شناسی سلولی و مولکولی، دانشکده علوم زیستی، واحد تنکابن، دانشگاه آزاد اسلامی، تنکابن، ایران