fa بررسی امکان شناسایی هلیکوباکتر پیلوری از شیر گوسفند و بز روستاهای اطراف مشهد به روش کشت و PCR عمومى General پژوهشي Research <p style="DIRECTION: rtl" align="justify"><strong>سابقه و هدف: </strong>هلیکوباکتر پیلوری شایع­ترین عفونت گوارشی دنیا می­باشد. بعضی از پژوهشگران آلودگی به هلیکوباکتر پیلوری در چوپان­ها را با تماس آنها با گوسفند مرتبط می­دانند. با این وجود در تحقیقی دیگر که بر روی 440 نمونه شیر گوسفند انجام گرفت پژوهشگران نتوانستند هلیکوباکتر پیلوری را جدا نمایند . نظر به نتایج متناقض، هنوز انتقال هلیکوباکتر پیلوری از شیر نشخوارکنندگان کوچک به انسان و احتمال زئونوز بودن بیماری (بیماری مشترک انسان و دام) به اثبات نرسیده است و تحقیقات در این مورد ادامه دارد. شناخت راه­های انتقال این باکتری به انسان، به عنوان شایع­ترین عفونت گوارشی، برای شناسایی راه­های پیشگیری و درمان ضروری است. </p><p style="DIRECTION: rtl" align="justify"><strong>مواد و روش‌ها:</strong> تعداد 100 نمونه شیر ( شامل 81 نمونه شیر گوسفند و 19 نمونه شیر بز) از 20 روستای اطراف مشهد به صورت نمونه­گیری خوشه‌ای تصادفی طی دو سال در فصل شیرواری جمع­آوری گردید. پرسشنامه­ای در خصوص وضعیت چوپان و خانواده از نظر وجود ناراحتی­های گوارشی، تنظیم، تایید و پر گردید. تمامی نمونه­های شیر بر روی دو نوع محیط ویژه هلیکوباکتر پیلوری یکی به نام HPSPA ( Helicobacter pylori Special Peptone Agar ) و دیگری محیط کلمبیا آگار ( Merck ) حاوی خون بدون فیبرین گوسفند، سرم جنین گاو، آنتی­بیوتیک­های وانکومایسین ، آمفوتریسین B ، بتاسیکلودکستر ی ن، تری­متوپریم، پلی­میکسین B کشت و در شرایط مناسب انکوبه شد. مراحل استخراج DNA بعد از سانتریفوژ روی رسوب همه­ی شیرها انجام گردید. ژن اوره­آز C ویژه هلیکوباکتر پیلوری با روش ملکولی واکنش زنجیره‌ای پلیمراز ( PCR ) ردیابی شد. </p><p style="DIRECTION: rtl" align="justify"><strong>نتایج:</strong> نتایج آزمون­های جداسازی و آ زمایش PCR برای تمامی شیرها منفی بود و هیچ یک از دو روش کشت و PCR نتوانست وجود هلیکوباکتر پیلوری یا ژن اوره­آز C که برای هلیکوباکتر پیلوری ویژه است را در نمونه‌های اخذ شده به اثبات برساند. اطلاعات پرسش­نامه نشان داد که 20 درصد از چوپانان و 25 درصد از خانواده­های آنان و نیز در 10 درصد موارد چوپان به همراه خانوادهاشان به نوعی از ناراحتی‌های گوارشی گلایه دارند ولی با توجه به اینکه این امر موضوع پژوهش­های جداگانه­ای بود میزان ارتباط این ناراحتی­ها با هلیکوباکتر پیلوری مشخص نشد. </p><p style="DIRECTION: rtl" align="justify"><strong>نتیجه‌گیری:</strong> نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که هیچ یک از دو روش کشت و PCR نتوانست وجود هلیکوباکتر پیلوری یا ژن اوره­آز C (ویژه هلیکوباکتر پیلوری) را به اثبات برساند. احتمالا در چرخه­ی زندگی این باکتری عوامل فراوانی نقش دارند که شناخت آنها برای تعیین راهبرد پیشگیری و درمان ضروری خواهد بود. اما در خصوص انتقال بیماری از نشخوارکنندگان کوچک و شیر آنها به انسان هنوز مطالب پیچیده زیادی وجود دارد که به پژوهش­های بیشتری نیاز دارد . </p> <p align="justify"><strong>Background: </strong>Helicobacter pylori (HP) is identified as the most common gastrointestinal (GI) infection agent in the world. According to some findings shepherd's Helicobacterial infection is due to their contacts to sheep. Considering the controversy, the transmission of HP from the milk of small ruminates to humans and the possibility of the Zenotic nature of the disease has not proven yet. Thus, recognition of the routes of transmission of bacterium to human is vital. </p><p align="justify"><strong>Materials and Methods : </strong>Using random clustering, 100 samples (81 sheep and 19 goat's samples) were taken from 20 villages of Mashhad suburb during two years. A questionnaire regarding the health status of the shepherds and their family from the point of view GI discomfort was taken. All taken samples were incubated on two specific HP media, HPSPA (Helicobacter pylori Special Peptone Agar) and Columbia Agar including antibiotics. Following centrifugation, DNA extraction was carried out on all precipitated samples. The specific Urease C gene of HP was traced through polymerase-chain reaction (PCR). <strong></strong></p><p align="justify"><strong>Results:</strong> Considering the negative results of both PCR and isolation tests, neither culture media nor PCR could prove the existence of HP gene or the Urease C gene for the specific HP in samples. Information showed that 20% of shepherds and 25% of their families and also 10% of both are complaining of GI discomfort, without any clear relation to HP. <strong></strong></p><p align="justify"><strong>Conclusion:</strong> The results showed that two incubation procedures could not detect HP<strong> </strong>or its gene, Urease C. Probably, the reason could be due to some multifactorial agents, essential for the determination of the strategy of prevention and health. Possibility of transmission of the agent from the small ruminants and milk to humans needs further investigation. </p> هلیکوباکترپیلوری، شیر گوسفند، PCR، کشت Helicobacter pylori, Sheep milk, PCR, Isolation 58 62 http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-643&slc_lang=fa&sid=1 Mohammad Hemmaty محمد همتی m_hemmaty@yahoo.com 290031947532846002771 290031947532846002771 Yes Elahe Binesh الهه بینش 290031947532846002772 290031947532846002772 No Mehangiz Khaje Karam Aldini مهرانگیز خواجه کرم الدینی 290031947532846002773 290031947532846002773 No Saeid Zibaei سعید زیبایی 290031947532846002774 290031947532846002774 No