fa بررسی اثر هم‌افزایی بربرین و سیس‌پلاتین بر القای آپوپتوز در رده سلولی Calu-6 و ارزیابی تغییرات به‌وجودآمده در سطح بیان ژن‌های BAX, p53 ,Caspase3, Caspase9 medicine, paraclinic medicine, paraclinic پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><span style="line-height:2;"><span style="color:#000000;"><span style="font-family:IRANyekan;"><span style="font-size:9.0pt;"><strong>سابقه و هدف:</strong> سرطان ریه شایع‌ترین علّت مرگ ناشی از سرطان در سراسر جهان است. بربرین یک آلکالوئید گیاهی و دارای خواص آنتی‌اکسیدانی، ضدسرطانی و ضدتوموری می‌باشد. سیس‌پلاتین یک القاکننده قوی آپوپتوز در اکثر انواع سلول‌های سرطانی می‌باشد. در مطالعه حاضر توانایی بربرین به‌تنهایی و در ترکیب با سیس‌پلاتین بر القای آپوپتوز در رده سلولی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Calu-6</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> (دودمان سرطان ریه انسانی) مورد بررسی قرار گرفته است. </span><br> <span style="font-size:9.0pt;"><strong>مواد و روش‌ها: </strong>در این پژوهش تجربی برای بررسی اثرات سیتوتوکسیک ترکیب توأم بربرین با سیس‌پلاتین بر تکثیر سلول‌های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Calu-6</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> از آزمون </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MTT</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> استفاده شد؛ جهت بررسی آپوپتوز در سلول‌های تحت‌تیمار از رنگ‌آمیزی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">DAPI</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> و آزمون </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Annexin V-FITC</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> استفاده شد؛ تغییرات در سطح بیان نسخه رونوشت ژن‌های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">BAX, Caspase 3,9, p53</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> با تکنیک </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Real-time PCR</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> ارزیابی شد. داده‌های کمّی حاصل توسط آزمون آماری واریانس یک‌طرفه </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">ANOVA</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> در سطح معنی‌داری 0/05</span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;"><</span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">P </span></span></em><span style="font-size:9.0pt;">تحلیل گردید. </span><br> <span style="font-size:9.0pt;"><strong>نتایج:</strong> نتایج حاصل از آزمون </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MTT</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> نشان داد که ترکیب بربرین با سیس‌پلاتین، تکثیر سلول‌های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Calu-6</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> را به‌صورت وابسته به غلظت و زمان، مهار می‌کند، مشاهدات مورفولوژیک حاصل از روش </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">DAPI</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> و نتایج آزمون </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Annexin V-FITC</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> نشان‌دهنده افزایش سلول‌های آپوپتوتیک در گروه‌های تیماری بود. نتایج </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Real-time PCR</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> نشان‌دهنده افزایش بیان نسخه رونوشت ژن‌های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">BAX, Caspase 3,9, p53</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> در گروه‌های تیماری بود.</span><br> <span style="font-size:9.0pt;"><strong>نتیجه‌گیری: </strong>نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که کاربرد توأم بربرین همراه با سیس‌پلاتین، تکثیر سلول‌های </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Calu-6</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> را مهار می‌کند و باعث القای آپوپتوز در این سلول‌ها می‌شود.</span></span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"><span style="line-height:2;"><span style="font-family:Times New Roman;"><span style="color:#000000;"><strong>Background: </strong>Lung cancer is the most common cause of cancer death worldwide. Berberine as a herbal alkaloid has antioxidant, anti-cancer and anti-tumor properties. Cisplatin is a potent inducer of apoptosis in most types of cancer cells. In the present study, investigated the ability of berberine alone and in combination with cisplatin to induce apoptosis in the Calu-6 cell line (human lung cancer cell line).<br> <strong>Materials and Methods: </strong>In this experimental study, MTT assay was used to evaluate the cytotoxic effects of combination of berberine with cisplatin on Calu-6 cell proliferation; DAPI staining and annexin V-FITC assay were also used to evaluate apoptosis in treated cells; changes in the level of transcripts of BAX, Caspase 3,9, p53 genes were examined by real-time PCR. Quantitative data were analyzed by one-way ANOVA at a significant level of <em>P</em><0.05.<br> <strong>Results: </strong>The MTT assay results showed that the combination of berberine with cisplatin inhibits the proliferation of Calu-6 cells in a concentration- and time-dependent manner. Morphological observations obtained from DAPI staining method and annexin V-FITC assay showed an increase in apoptotic cells in the treatment groups. The real-time PCR results showed an increase in the expression of transcripts of BAX, Caspase 3,9, p53 genes in the treatment groups.<strong><span dir="RTL"></span></strong><br> <strong>Conclusion:</strong> The results of this research showed that the concomitant use of berberine with cisplatin inhibits the proliferation of Calu-6 cells and induces apoptosis in these cells.<strong><span dir="RTL"></span></strong></span></span></span></div> سرطان ریه, آپوپتوز, بربرین, سیس‌پلاتین, رده سلولی Calu-6 Lung cancer, Apoptosis, Berberine, Cisplatin, Calu-6 cell line 1275 1285 http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-4003-1&slc_lang=fa&sid=1 Shadab Abhari شاداب ابهری shadabhari@gmail.com 2900319475328460043038 2900319475328460043038 No Department of Biology, Mashhad Branch, Islamic Azad University, Mashhad, I.R. Iran. گروه زیست‌شناسی، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران Javad Baharara جواد بهارآرا baharara78@gmail.com 2900319475328460043039 2900319475328460043039 Yes azad Department of Biology and Research Center, Mashhad Branch, Islamic Azad University, Mashhad, I.R. Iran. مرکز تحقیقات بیولوژی کاربردی تکوین جانوری، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران Saeedeh Zafar-Balanezhad سعیده ظفر بالانژاد mojgan_zafar@yahoo.com 2900319475328460043040 2900319475328460043040 No Department of Biology, Mashhad Branch, Islamic Azad University, Mashhad, I.R. Iran. گروه زیست‌شناسی، واحد مشهد، دانشگاه آزاد اسلامی، مشهد، ایران