fa بررسی تأثیر انجماد سریع بر بیان ژن‌های SPAG5 و SPAG9 اسپرم انسانی medicine, paraclinic medicine, paraclinic پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:9.0pt;">سابقه و هدف:</span></span></strong> <strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">آنتی‌ژن‌های اختصاصی اسپرم </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">(SPAG)</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">، نقش مهمی در بروز سرطان‌های مختلف، مانند سرطان سینه، ریه، کبد و مثانه دارند. همچنین </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">SPAG</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">ها اهمیت بالایی در عملکردهای اسپرم، همچون تحرک دارند. با این‌حال به‌نظر می‌رسد انجماد اسپرم به‌عنوان یکی از روش‌های کمک‌باروری می‌تواند بر بیان این ژن‌ها تأثیرگذار باشد. هدف مطالعه حاضر، ارزیابی اثر انجماد، بر بیان </span></span></strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">SPAG</span></span></span></em><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">های 5 و 9 اسپرم انسانی می‌باشد.</span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:9.0pt;">مواد و روش‌ها:</span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> در مطالعه تجربی حاضر، </span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">12 نمونه نرمال از نظر پارامترهای طبیعی اسپرم، از منی مردان مراجعه‌کننده به پژوهشگاه رویان جمع‌آوری گردید و با روش سانتریفیوژ گرادیان، غلظت اسپرم‌های دارای تحرک مؤثر بالا جداسازی شد. نمونه‌ها به دو گروه غیرانجمادی (گروه کنترل) و گروه انجمادی تقسیم شدند. پس از انجماد به روش سریع و نگهداری برای سه روز در تانک نیتروژن، نمونه‌ها زیر شیر آب سرد ذوب شدند و به</span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">&shy;</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">مدت دو ساعت در انکوباتور دارای </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CO2</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> قرار گرفتند. استخراج </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">RNA</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> در هر دو گروه با استفاده از ترایزول صورت گرفت و ارزیابی ژن‌های </span></span></strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">SPAG9</span></span></span></em><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> و </span></span></strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">SPAG5</span></span></span></em><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> با روش </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Real-time PCR</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> انجام شد.</span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;"></span></span><br> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:9.0pt;">نتایج:</span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> براساس تجزیه و تحلیل آماری، بیان </span></span></strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">SPAG5</span></span></span></em><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> در گروه انجمادی نسبت به گروه کنترل کاهش معنی‌داری داشت (05/0</span></span></strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">P</span></span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">&le;</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">)؛ در مقابل تفاوت معنی‌داری در بیان ژن </span></span></strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">SPAG9</span></span></span></em><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> بین گروه کنترل و انجمادی مشاهده نشد.</span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;"></span></span></span><br> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:9.0pt;">نتیجه‌گیری:</span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> با در نظر گرفتن شوک حاصل از سرما در آینده سلول، کاهش بیان معنی‌دار </span></span></strong><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">SPAG5</span></span></span></em><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> در گروه انجمادی می‌تواند بیانگر بروز اثرات احتمالی آن در جنین حاصل باشد.</span></span></strong></div> <div style="text-align: justify;"><span style="font-family:Times New Roman;"><strong>Background: </strong>Sperm associated antigens (SPAGs) play an important role in the incidence of various cancers including breast, lung, liver, and bladder. SPAGs are also important in sperm functions, such as motility. However, it seems that sperm cryopreservation as one of the assisted reproductive techniques (ART), can affect the expression of these genes. This study aimed to evaluate the effect of freezing on the expression of human <em>SPAG</em> 5 and <em>9</em> in human spermatozoa.<br> <strong>Materials and Methods: </strong>In the present experimental study, twelve semen samples in terms of normozoospermic parameters were collected from individuals referred to the Royan Institute, and progressive motile sperms were isolated by density gradient centrifugation (DGC). Each sample was divided into two, non-frozen (control) and frozen groups. After rapid freezing and three-day storage in liquid nitrogen, samples were thawed in tap water and incubated for 2 hours of recovery-time in a CO₂ incubator. RNA extraction in both groups was performed using TRIzol; and <em>SPAG5</em> and <em>9</em> were evaluated by Real-time PCR technique.<br> <strong>Results: </strong>Based on statistical analysis, the expression of <em>SPAG5</em> decreased significantly in the frozen group compared to the control group (<em>P</em>&le;0.05); In contrast, there was no significant difference in the expression of <em>SPAG9</em> between the control and frozen groups.<br> <strong>Conclusion: </strong>Considering the cold shock in the future of cell, a significant reduction in <em>SPAG5</em> expression in the frozen group may indicate probable influences in the derived fetus.</span></div> اسپرم, آنتی‌ژن, انجماد Sperm, Antigen, Cryopreservation 508 515 http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3688-1&slc_lang=fa&sid=1 Samaneh Faraji سمانه فرجی ms.a.faraji7506@gmail.com 2900319475328460031723 2900319475328460031723 No Department of Molecular and Cellular Biology, Faculty of Basic Science and Advanced Technologies in Biology, University of Science and Culture, ACECR, Tehran, I.R. Iran. دانشکده علوم پایه و فناوری‌های نوین زیستی، دانشگاه علم و فرهنگ، تهران، ایران Leila Rashki Ghaleno لیلا راشکی قلعه نو lrashki@yahoo.com 2900319475328460031724 2900319475328460031724 No Department of Embryology, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, ACECR, Tehran, I.R. Iran. گروه جنین‌شناسی، مرکز تحقیقات پزشکی تولیدمثل، پژوهشکده زیست‌شناسی و علوم پزشکی تولیدمثل، پژوهشگاه رویان، جهاد دانشگاهی، تهران، ایران Mohsen Sharafi محسن شرفی sharafi2000@gmail.com 2900319475328460031725 2900319475328460031725 No Department of Embryology, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, ACECR, Tehran, I.R. Iran. گروه پرورش و مدیریت طیور، دانشکده کشاورزی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران Maryam Hezavehei مریم هزاوه ای m_hezavehi@yahoo.com 2900319475328460031726 2900319475328460031726 No Department of Embryology, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, ACECR, Tehran, I.R. Iran. گروه جنین‌شناسی، مرکز تحقیقات پزشکی تولیدمثل، پژوهشکده زیست‌شناسی و علوم پزشکی تولیدمثل، پژوهشگاه رویان، جهاد دانشگاهی، تهران، ایران Mehdi Totonchi مهدی توتونچی totonchimehdi@gmail.com 2900319475328460031727 2900319475328460031727 No Department of Genetics, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, ACECR, Tehran, I.R. Iran. گروه ژنتیک، مرکز تحقیقات پزشکی تولیدمثل، پژوهشکده زیست‌شناسی و علوم پزشکی تولیدمثل، پژوهشگاه رویان، جهاد دانشگاهی، تهران، ایران Abdolhossein Shahverdi عبدالحسین شاهوردی Shahverdi@royaninstitute.org 2900319475328460031728 2900319475328460031728 No Reproductive Epidemiology Research Center, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, ACECR, Tehran, I.R. Iran گروه جنین‌شناسی، مرکز تحقیقات پزشکی تولیدمثل، پژوهشکده زیست‌شناسی و علوم پزشکی تولیدمثل، پژوهشگاه رویان، جهاد دانشگاهی، تهران، ایران Rouhollah Fathi روح الله فتحی rfathi79@royaninstitute.org 2900319475328460031729 2900319475328460031729 Yes Department of Embryology, Reproductive Biomedicine Research Center, Royan Institute for Reproductive Biomedicine, ACECR, Tehran, I.R. Iran. گروه جنین‌شناسی، مرکز تحقیقات پزشکی تولیدمثل، پژوهشکده زیست‌شناسی و علوم پزشکی تولیدمثل، پژوهشگاه رویان، جهاد دانشگاهی، تهران، ایران