fa اثر والپروئیک اسید بر بیان ژن‌های مسیر خارجی (DR4, DR5, FAS, FAS-L, TRAIL) و مسیر داخلی آپوپتوز (BAX, BAK and APAF1, Bcl-2, and Bcl-xL)، میزان زنده بودن سلول و آپوپتوز سلولی در سرطان کبد رده سلولی PLC/PRF5 medicine, paraclinic medicine, paraclinic پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:9.0pt;">سابقه و هدف:</span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> استیلاسیون و دِاستیلاسیون هیستون، نقش مهمی در نسخه‌برداری و بیان ژن بازی می‌کنند. وضعیت استیلاسیون پروتئین‌های هیستونی و غیرهیستونی به‌وسیله آنزیم‌های هیستون استیل ترانس فراز </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">(histone acetyl-transferases, HATs)</span></span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> <strong>و هیستون دِاستیلاز </strong></span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">(histone deacetylases, HDACs)</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> تعیین می‌شود. مهارکننده‌های آنزیم‌های هیستون دِاستیلاز، اثرات مولکولی و خارج سلولی مختلفی القا می‌کنند که منجر به ایفای نقش ضدسرطانی آن‌ها می‌شود. </span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">این تحقیق به منظور بررسی اثر داروی والپروئیک اسید بر بیان ژن‌های مسیر خارجی و مسیر داخلی آپوپتوز، میزان زنده بودن سلول و آپوپتوز در سرطان کبد رده سلولی </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PLC/PRF5</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> طراحی شد.</span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:9.0pt;">مواد و روش‌ها:</span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> سلول‌های سرطانی کبد رده </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">PLC/PRF5</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> کشت داده شدند </span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">و پس از این‌که هم‌پوشانی سلول‌ها به حدود 80 درصد رسید، سلول‌ها با تریپسین جمع‌آوری گریدند و پس از شستشو، در پلیت با غلظت 10⁵&times; 3 کشت داده شدند. پس از 24 ساعت، محیط کشت با محیط حاوی داروی والپروئیک اسید تیمار شدند (گروه کنترل فقط </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">DMSO</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> دریافت کردند). 24، 48 و 72 ساعت پس از تیمارکردن، </span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">به منظور تعیین میزان زنده بودن سلول، سلول‌های آپوپتوتیک و بیان ژن، به‌ترتیب تکنیک‌های </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">MTT</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">، فلوسیتومتری و </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Real-time</span></span></span><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> <strong>انجام شد. </strong></span></span><br> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:9.0pt;">نتایج:</span></span></strong><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> والپروئیک اسید به‌طور معنی‌داری باعث مهار رشد سلولی، القای آپوپتوز، کاهش بیان ژن‌های </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">Bcl-2, and Bcl-xL</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> و افزایش بیان ژن‌های </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">DR4, DR5, FAS, FAS-L, </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">TRAIL, </span></span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">BAX, BAK and APAF1</span></span></span><strong><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> گردید. </span></span></strong><br> <strong><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:9.0pt;">نتیجه‌گیری:</span></span></span></strong><strong><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="font-family:B Lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> به‌نظر می‌رسد والپروئیک اسید نقش آپوپتوزی خود را از طریق مسیرهای آپوپتوزی داخلی و خارجی در سرطان کبد ایفا می‌کند.</span></span></span></strong></div> <div style="text-align: justify;"><span style="font-family:Times New Roman;"><strong>Background:</strong> Histone acetylation and deacetylation play an important role in transcription and gene expression. The acetylation status of histones and non-histone proteins is determined by histone acetyl-transferases (HATs) and histone deacetylases (HDACs). Histone deacetylase inhibitors (HDACIs) induce various molecular and extracellular effects, leading to potent anti-cancer activities. The current study was designed to investigate the effect of valproic acid<span dir="RTL">)</span> VPA<span dir="RTL">(</span> on extrinsic and intrinsic apoptotic pathways, cell viability, and apoptosis in hepatocellular carcinoma PLC/PRF5 cell line.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> The hepatocellular carcinoma PLC/PRF5 was cultured. When cells approximately became 80% confluent, 3&times;10⁵ cells were seeded into 96 and 24‑well plates. After 24 h, the medium was replaced with the medium contains VPA (except control groups which were treated with DMSO). After 24, 48, and 72 h, to determine cell viability, cell apoptosis and gene expression, MTT assay, flow cytometry and Real-time quantitative RT-PCR (qRT-PCR) were done respectively.<br> <strong>Results:</strong> VPA inhibited cell viability, induced apoptosis, decreased Bcl-2, and Bcl-xL and increased DR4, DR5, FAS, FAS-L, TRAIL, BAX, BAK and APAF1 significantly.<br> <strong>Conclusion: </strong>It seems that VPA can play its role through intrinsic and extrinsic apoptotic pathways in hepatocellular carcinoma PLC/PRF5 cell line.</span></div> والپروئیک اسید, مسیر آپوپتوز, سرطان کبد, رده سلولی PLC/PRF5 Valproic acid, Apoptotic pathway, Hepatocellular carcinoma, PLC/PRF5 CELL line 601 609 http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3693-1&slc_lang=fa&sid=1 Masumeh Sanaei معصومه سنائی msanaei86@gmail.com 2900319475328460032403 2900319475328460032403 No Research Center for Non-Communicable Diseases, Jahrom University of Medical Sciences, Jahrom, I.R. Iran. مربی، مرکز تحقیقات بیماری‌های غیرواگیر، دانشگاه علوم پزشکی جهرم، جهرم، ایران Fraidoon Kavoosi فریدون کاوسی kavoosifraidoon@gmail.com 2900319475328460032404 2900319475328460032404 Yes Research Center for Non-Communicable Diseases, Jahrom University of Medical Sciences, Jahrom, I.R. Iran. دانشیار، مرکز تحقیقات بیماری‌های غیرواگیر، دانشگاه علوم پزشکی جهرم، جهرم، ایران