fa استخراج و خالص سازی کپسول استافیلوکوک اورئوس Type 2) Smith diffuse) عمومى General پژوهشي Research <p style="DIRECTION: rtl" align="justify"><strong>سابقه و هدف:</strong> جدا سازی و استخراج کپسول پلی ساکاریدی اولین قدم در راه تهیه و ساخت واکسن های جلوگیری کننده در عفونت های حاصل از سوش های کپسول دار استافیلوکوک اورئوس می باشد. این تحقیق به منظور استخراج و تهیه کپسول استافیلوکوک اورئوس Type 2 انجام گرفت. </p><p style="DIRECTION: rtl" align="justify"><strong>مواد و روش ها:</strong> تحقیق به روش توصیفی از نوع اکتشافی است. باکتری استافیلوکوک اورئوس سویه (Smith diffuse (ICH 70 بر روی محیط Broth) BHI) در انکوباتور شیکردار در شرایط هوازی و دمای 37 درجه سانتی گراد و rpm=200 و رسیدن آن به مرحله رشد نهایی، کپسول باکتری با روش اسید رقیق شده و حرارت استخراج گردید. سپس در طول شب در مقابل آب مقطر در 4 درجه سانتی گراد دیالیز شده و آنگاه لیوفیلیزه گردید. پودر لیوفیلیزه شده با استفاده از یک ستون DEAE سلولز به ابعاد cm 50×2.6 با روش گرادیانت از بافرهای 0.01M تا 1M بیکربنات آمونیوم با سرعت 60mt/h کروماتوگرافی تعویض یون Ion exchange chromatography گردیده و تخلیص شد. پلات طیف جذبی پلی ساکارید به دست آمده و کپسول خالص (استاندارد) با روش کالری متری توسط اسپکتروفوتومتر اسکن دار رسم گردید. </p><p style="DIRECTION: rtl" align="justify"><strong>یافته ها:</strong> پلی ساکارید کپسولی از سلول کامل در انتهای فاز رشد نهایی باکتری در 0.1HCL در 100 درجه سانتی گراد به متراکم شود. پلات های مربوط به طیف جذبی پلی ساکاریدهای حاصل و استاندارد با استفاده از روش کالری متری H2SO4/glacial acetic acid assay در فاصله 620-350 نانومتر رسم گردید و نشان داد که کروماتوگرام های حاصل از آنتی ژن تخلیص شده قبلی و پلی ساکارید جدا شده در این تحقیق تطابق کامل دارد و موید صحت کربوهیدرات کپسولی استخراج و تخلیص شده می باشد. </p><p style="DIRECTION: rtl" align="justify"><strong>نتیجه گیری و توصیه ها:</strong> استخراج و خالص سازی کپسول استافیلوکوک اورئوس Type 2 مقدور است و تحقیق برای ساخت واکسن های جلوگیری کننده را توصیه می نماید. </p> <p align="justify"><strong>History and Objectives:</strong> Extraction and purification of polysaccharide capsule is the first step for preparation preventive vaccines in infections as a result of encapsulated Staphylococcus aureus. This study was carried out to extract and purify Staphylococcus aureus type 2. </p><p align="justify"><strong>Materials and Methods:</strong> The descriptive and explorative strategy of this study was conducted on Staphylococcus aureus (Smith diffuse variant) in BHI broth in a shaking incubator (200 rpm) in an aerobic condition at a temperature of 37°C. The capsule was extracted using dilute acid and heating method. Then, dialysis was done overlight at 4°C and the product was lyophilized. Lyophilized powder was purified using a cellulose DEAE column (2.6×50 cm) by gradient method using bicarbonate ammonium buffers (0.01-1 M) at a velocity of 60 mt/h (Ion exchange chromatography). Finally absorption spectrum was plotted and purified capsule was analyzed using scanning spectrophotometer. </p><p align="justify"><strong>Results:</strong> Polysaccharide capsule was collected in final growth phase at 0.1 HCL and at a temperature of 100°C. Absorption spectrum were evaluated using H2SO4/galacial acetic acid assay at wavelength range of 350-620 nm. The result showed that chromatographs are well matched with previously purified antigens. </p><p align="justify"><strong>Conclusion and Recommendations:</strong> It is concluded that it is possible to extract and purify the capsule of Staphylococcus aureus type 2 and it is recommended to produce the related preventive vaccines. </p> استافیلوکوک اورئوس، کپسول پلی ساکاریدی، فاز رشد نهایی، آنتی ژن تخلیص شده Staphylococcus aureus, Polysaccharide capsule, Final growth phase, Purified antigen, Extraction 41 46 http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-363&slc_lang=fa&sid=1 Sayed asghar Havaie سید اصغر هوایی 290031947532846001658 290031947532846001658 Yes Taghi Naserpour Farivar تقی ناصرپور فریور 290031947532846001659 290031947532846001659 No Mahmoud Saffari محمود صفاری 290031947532846001660 290031947532846001660 No