fa بررسی بیان ژن های فاکتور نوروتروفیک در سلول های بنیادی چربی انسانی کشت شده در محیط های سرم دار و بدون سرم medicine, paraclinic medicine, paraclinic پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:9.0pt;">سابقه و هدف:</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> از آنجا که سرم گاوی در انسان ایمونولوژیک بوده و به&shy; هنگام پیوند خطر انتقال عفونت را به &shy;همراه دارد، در این تحقیق سرعت تکثیر، بقاء و بیان ژن &shy;های نوروتروفینی در سلول&shy; های بنیادی چربی انسانی کشت داده شده در محیط بدون سرم و سرم&shy;دار با یکدیگر مقایسه شدند. </span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:9.0pt;">مواد و روش &shy;ها:</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> در این مطالعه تجربی سلول&shy; های بنیادی از بافت چربی زیرجلدی ناحیه شکم 15 خانم سزارینی استخراج شده و در محیط کشت </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">-MEM</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">&alpha; <strong>حاوی 10 درصد سرم جنین گاوی یا محیط فاقد سرم کشت داده شدند. بنیادی بودن سلول&shy; های پاساژ چهارم با روش فلوسایتومتری و قابلیت تمایزشان به سلول&shy; های چربی و استخوان تأیید شد. تکثیر و بقاء سلولی، به &shy;ترتیب با روش&shy; های همو&shy;سایتو&shy;متری و </strong></span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">MTT</span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> بررسی شد. همچنین، میزان بیان ژن&shy; های نوروتروفیک با روش</span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">RT-PCR </span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">&nbsp;ارزیابی گردید.</span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:9.0pt;">نتایج:</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> سلول &shy;ها به نشان&shy;گر&shy;های </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD44</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD73</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD90</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD105</span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> پاسخ مثبت داده و به نشان&shy;گرهای </span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD34</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> <strong>و </strong></span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">CD45</span></span></span><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> <strong>پاسخ منفی دادند و توانایی تمایز به سلول&shy; های چربی و استخوان را داشتند. بقاء و تکثیر سلول</strong></span></span><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">&shy;</span></span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">های کشت شده در محیط سرم&shy;دار به&shy; مدت 48 ساعت نسبت به محیط بدون سرم، به&shy; طور معنی&shy; داری افزایش یافته بود. سرم باعث افزایش معنی &shy;داری در میزان بیان ژن&shy; های</span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;"> BDNF</span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">و</span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:9.0pt;">NT-3 </span></span></span><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;">&nbsp;نسبت به سلول&shy; هایی که در محیط بدون سرم کشت داده شده بودند، گردید. </span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:9.0pt;">نتیجه &shy;گیری:</span></span></strong><strong><span style="font-family:b lotus;"><span style="font-size:9.0pt;"> با حذف سرم و بهینه &shy;سازی شرایط کشت می &shy;توان سلول&shy; های مناسب&shy; تری برای پیوند فراهم کرد. نتایج به&shy; دست آمده را می &shy;توان مقیاسی جهت یافتن جایگزین مناسب برای سرم گاوی قرار داد.</span></span></strong></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Background:</strong> <em>Fetal bovine serum</em> (FBS) is immunogenic for human and may transmit infection in the case of transplantation. So, this study aimed to compare the proliferation and survival rates of human adipose stem cells (hASCs), and their neurotropic factor genes expression in serum-containing and serum-free media.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> In this experimental study, stem cells were extracted from the abdominal subcutaneous adipose tissue of 15 cesarean women and cultured in &alpha;-MEM containing 10% of FBS or serum-free medium. The stemness of fourth passage of the cells was confirmed using the flow cytometry method, and their differentiation into adipocytes and osteocytes was also confirmed. Cell proliferation and survival were assessed using hemocytometry and MTT [3- (4,5-Dimethyltiazol-2-yl) -2,5-Diphenyltetrazolium bromide] methods, respectively. In addition, the expression of neurotrophic factor genes was analyzed by the real-time polymerase chain reaction method.<br> <strong>Results:</strong> The cells had positive response to CD44, CD73, CD90, and CD105 markers, while they responded negatively to CD34 and CD45 markers and had the ability to differentiate into adipocytes and osteocytes. The survival and proliferation of the cells cultured in the serum-based medium for 48 hours were significantly increased compared to those cultured in the serum<span dir="RTL">-</span>free medium. Moreover, serum resulted in a significant increase in BDNF and NT-3 genes expression, compared to the cells cultured in the serum-free medium.<br> <strong>Conclusions:</strong> More suitable cells can be provided for transplantation with serum deletion and culture medium optimization. The results can be matched to find an appropriate replacement for FBS.</div> سلول های بنیادی چربی انسان, فاکتورهای نوروتروفیک, تکثیر, بقاء, سرم Human adipose stem cells, Neurotrophic factors, Proliferation, Survival, Serum 83 93 http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2187-2&slc_lang=fa&sid=1 Arezoo Amiri آرزو امیری amiri.arezoo299@yahoo.com 2900319475328460020494 2900319475328460020494 No Faculty of Biology and Institute of Biological Sciences, Damghan University, Damghan, I. R. Iran. دانشکده زیست شناسی و پژوهشکده علوم زیستی، دانشگاه دامغان، دامغان، ایران Maryam HajiGhasem Kashani مریم حاجی قاسم کاشانی kashani@du.ac.ir 2900319475328460020493 2900319475328460020493 Yes Faculty of Biology and Institute of Biological Sciences, Damghan University, Damghan, I. R. Iran. دانشکده زیست شناسی و پژوهشکده علوم زیستی، دانشگاه دامغان، دامغان، ایران Mohammad Taghi Ghorbanian محمد تقی قربانیان ghorbanian@du.ac.ir 2900319475328460020495 2900319475328460020495 No Faculty of Biology and Institute of Biological Sciences, Damghan University, Damghan, I. R. Iran. دانشکده زیست شناسی و پژوهشکده علوم زیستی، دانشگاه دامغان، دامغان، ایران