fa ارزیابی تاثیر تستوسترون بر تشکیل کلونی زایی اسپرماتوگونی گوسفند در محیط آزمایشگاه عمومى General پژوهشي Research <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>سابقه و هدف:</strong> سلول&shy; های بنیادی اسپرماتوگونی با حفظ تعادل بین خودنوسازی و تمایز سبب تداوم روند اسپرماتوژنز می&shy; شوند. هدف از انجام مطالعه حاضر بررسی تاثیر غلظت&shy; های مختلف تستوسترون بر کلونی‌زایی سلول&shy; های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند می‌باشد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>مواد و روش‌ها: </strong>سلول&shy; های اسپرماتوگونی بیضه گوسفند نابالغ با روش هضم آنزیمی دو مرحله‌ای جدا و به&shy;روش حذف تمایزی خالص&shy; سازی شدند. سپس، به&shy; مدت 13 روز به چهار روش تیمار شدند: گروه شاهد شامل کشت ساده سلول&shy; های اسپرماتوگونی در محیط <span dir="LTR">DMEM</span> حاوی 1 درصد آنتی&shy; بیوتیک و 5 درصد <span dir="LTR">FBS</span> بود و به تیمارهای 1، 2 و 3 علاوه بر محیط بالا به&shy; ترتیب 60، 120 و 240 میکروگرم بر میلی &shy;لیتر تستوسترون اضافه شد. تعویض محیط کشت هر 72 ساعت انجام شد. ماهیت سلول&shy; ها با استفاده از رنگ&shy;آمیزی ایمونوسیتوشیمی علیه آنتی&shy;ژن <span dir="LTR">PGP9.5</span> تائید گردید. در نهایت درصد حیات سلول‌ها بلافاصله پس از جداسازی، و هم&shy; چنین تعداد و مساحت کلونی &shy;های تشکیل شده در روزهای 5، 9 و 13 پس از کشت به&shy; وسیله میکروسکوپ معکوس بررسی شد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>نتایج: </strong>درصد حیات سلول &shy;های اسپرماتوگونی بعد از جداسازی 3/63&plusmn;86/77 درصد بود. کاهش تعداد و مساحت کلونی&shy; های اسپرماتوگونی تیمار 2 و 3 نسبت به کنترل و تیمار 1 معنی&shy; دار بود (<span dir="LTR"><0/05</span><em><span dir="LTR">P</span></em>). به&shy; علاوه، تعداد و مساحت کلونی‌ها در روز 13 در مقایسه با روزهای 5 و 9 افزایش معنی‌داری داشت (<span dir="LTR"><0/05</span><em><span dir="LTR">P</span></em>).</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>نتیجه‌گیری:</strong> نتایج مطالعه حاضر نشان می&shy; دهد تستوسترون در القاء کلونی&shy;زایی سلول&shy; های بنیادی اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه نقش مثبتی نداشته و با افزایش دوز باعث کاهش تعداد و مساحت کلونی &shy;ها در محیط کشت می‌شود.</p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong>Background:</strong> Spermatogonial stem cells (SSCs) are able to establish balance between self-renewal and differentiation, thereby maintain the spermatogenesis. The aim of this study was to investigate effects of different doses of Testosterone on SSCs colony formation.</span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong>Materials and Methods:</strong> The cells were isolated from testes of prepubertal lambs by two-step enzymatic digestion and then purified by differential platting. The cells were cultured for 13 days in 4 groups: Control [DMEM containing antibiotic (1%) and FBS (5%)]; and Treatment groups 1, 2 and 3 (DMEM+Testosterone 60, 120 and 240 &micro;g/ml, respectively). The culture media was changed every 72 h. Identification of SSCs was performed by immunocytochemistry staining against PGP9.5. Finally, following the evaluation of percentage for viability rate of SSCs immediately after isolation and also the number and surface areas of the colonies on days 5, 9 and 13 after the beginning of culturing by invert microscopy, the analyses were made using statistical tests.</span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong>Results:</strong> The percentage for viability rate of SSCs after isolation was 86.77&plusmn;3.63%. The decrease in the number and surface areas of spermatogonial colonies in Treatment groups 2 and 3 were significant compared to Control and Treatment group1 (<em>P</em><0.05). Furthermore, colony number and surface area were significantly increased at day 13 compared to those of the days 5 and 9 (<em>P</em><0.05).</span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong>Conclusion:</strong> The results of this study showed that Testosterone has no effect on colony induction of SSCs in vitro. Increasing the Testosterone dose decreases the colony number and surface area of SSCs.</span></p> سلول بنیادی, اسپرماتوگونی, تشکیل کلونی, تستوسترون, PGP9.5 Stem cell, Spermatogonia, Colony formation, Testosterone, PGP9.5 205 213 http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-176-1269&slc_lang=fa&sid=1 Ataollah Zandi عطااله زندی 2900319475328460018287 2900319475328460018287 No Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, I. R. Iran. دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه Peyman Rahimi-Feyli پیمان رحیمی‌فیلی peymanrahimi@razi.ac.ir 2900319475328460018288 2900319475328460018288 Yes Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, I. R. Iran. گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه Ali Asghar Moghaddam علی‌اصغر مقدم 2900319475328460018289 2900319475328460018289 No Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, I. R. Iran. گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه زهرا نیکوصفت 2900319475328460018290 2900319475328460018290 No Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, I. R. Iran. گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه