fa اثرات غلظت های مختلف ساکاروز و سرم جنین گوساله بر زنده‌ مانی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی بره قبل و بعد از انجماد medicine, paraclinic medicine, paraclinic پژوهشي Research <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>سابقه و هدف<span dir="LTR">:</span> </strong>سلول&shy; های بنیادی اسپرماتوگونی کاربردهای فراوانی در طب تولید مثلی و زیست&shy;فناوری دارند. جهت نگهداری طولانی&shy;مدت این سلول&shy; ها از تکنیک انجماد استفاده می&shy; شود. هدف از مطالعه حاضر، بررسی تاثیر غلظت&shy; های مختلف <span dir="LTR">FBS</span> و ساکاروز روی درصد حیات اسپرماتوگونی بره بود.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>مواد و روش &shy;ها:</strong> سلول&shy; های بیضه&shy; بره های نابالغ با روش هضم آنزیمی دو مرحله&shy; ای استخراج شده و با حذف تمایزی خالص&shy;سازی گردید. سپس، سلول&shy; ها به 6 گروه آزمایشی تقسیم بندی شدند. در گروه&shy; های 1، 2 و 3 از <span dir="LTR">FBS</span> با غلظت 10 درصد و از ساکاروز به&shy; ترتیب با غلظت&shy; های 0/07، 0/14 و 0/21 مولار و در گروه&shy; های 4، 5 و 6 از <span dir="LTR">FBS</span> با غلظت 20 درصد و از ساکاروز به&shy; ترتیب با غلظت &shy;های 0/07، 0/14 و 0/21 مولار استفاده شد. درصد حیات سلول&shy; ها در گروه &shy;های مختلف آزمایشی در سه مرحله مختلف (بلافاصله پس از استخراج، متعاقب افزودن محیط انجماد و پس از یخ<span dir="LTR">&shy;</span>گشایی) مورد سنجش قرار &shy;گرفت. جهت شناسایی سلول‌‌های اسپرماتوگونی تیپ <span dir="LTR">A</span> از رنگ‌آمیزی ایمنوسیتوشیمی علیه <span dir="LTR">PGP9.5</span> استفاده شد.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>نتایج:</strong> نتایج این مطالعه نشان می &shy;دهد مواد محافظ در برابر انجماد اثرات سمی روی اسپرماتوگونی بره ندارند. هم<span style="font-size:8px;"> &shy;</span>چنین، درصد زنده&shy;مانی این سلول&shy; ها در محیط حاوی 10 درصد <span dir="LTR">FBS</span> به&shy; طور معنی &shy;داری بیشتر از درصد زنده &shy;مانی آنها در محیط حاوی 20 درصد <span dir="LTR">FBS</span> بود. علاوه بر این، افزایش غلظت &shy;های ساکاروز (0/07، 0/14 و 0/21) تاثیر مثبتی روی درصد زنده&shy; مانی اسپرماتوگونی نداشت.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>نتیجه &shy;گیری: </strong>در مجموع به &shy;نظر می<span dir="LTR">&shy;</span>رسد استفاده از محیط انجماد حاوی 10 درصد <span dir="LTR">DMSO</span> توام با 10 درصد <span dir="LTR">FBS</span> و 0/07 مولار ساکاروز برای انجماد &nbsp;اسپرماتوگونی بره مناسب است.</p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong>Background:</strong> Spermatogonial stem cells (SSCs) have diverse applications in reproductive medicine and biotechnology. Cryopreservation is the well-known method for long-term storage of these cells. The aim of this study was to investigate the effect of different concentrations of fetal bovine serum (FBS) and Sucrose on the viability rate of spermatogonial cells.</span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong>Materials and Methods:</strong> Testicular cells of pre-pubertal lambs were separated in a two-step enzymatic isolation and purified by differential plating. Then, the cells were divided in 6 groups. Groups 1, 2 and 3 were treated with FBS (10%) and Sucrose (0.07, 0.14 and 0.21 molar concentration (M) ) and groups 4, 5 and 6 with FBS (20%) and Sucrose (0.07, 0.14 and 0.21 M), respectively. The viability rate of the cells was evaluated immediately after isolation, addition of cryoprotectant agents and thawing procedures. Identification of spermatogonial cells in the culture was performed using the&nbsp; &nbsp;immunocytochemistry staining against PGP9.5.</span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong>Results:</strong> The results showed that cryoprotectant do not have any harmful effects on lamb&acute;s SSCs. Moreover, viability rate of the cells in freezing media containing FBS (10%) is significantly higher than the media containing FBS (20%). Furthermore, increasing concentrations of Sucrose (0.07, 0.14 and 0.21 M) &nbsp;&nbsp;had no beneficial effect on the spermatogonial viability rate.</span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:times new roman;"><strong>Conclusion:</strong> It was concluded that freezing media containing dimethyl sulfoxide (10%) and FBS (10%) and Sucrose (0.07 M) is appropriate for cryopreservation of lamb spermatogonial cells.</span></p> <p></p> اسپرماتوگونی بره, انجماد, ساکاروز, سرم جنین گاو, PGP9.5 Lamb Spermatogonia, Cryopreservation, Sucrose, Fetal bovine serum, PGP9.5 157 164 http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-176-1266&slc_lang=fa&sid=1 Ali Asghar Moghaddam علی اصغر مقدم 2900319475328460018272 2900319475328460018272 No Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, I. R. Iran. گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه Peyman Rahimi-Feyli پیمان رحیمی فیلی peymanrahimi@razi.ac.ir 2900319475328460018273 2900319475328460018273 Yes Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, I. R. Iran. گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه Zahra Nikousefat زهرا نیکوصفت 2900319475328460018274 2900319475328460018274 No Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, I. R. Iran. گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه Sajad Zarghami سجاد ضرغامی 2900319475328460018275 2900319475328460018275 No Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, I. R. Iran. دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه