fa تولید آنتی‌بادی پلی‌کلونال علیه سلول‌های P388D1 عمومى General پژوهشي Research <p align="justify"><strong>سابقه و هدف:</strong> تکنیک‌های هم‌کشت ( co-culture ) در مطالعه تاثیرات متقابل سلولها نقش مهمی دارند. قابلیت افتراق بین جمعیت‌های سلولی هم‌کشت شده در ارزیابی این نوع کشت نقش اساسی دارد. سلول‌های P388D1 از گروه سلول‌های شبه ماکروفاژی هستند ولی ظاهری شبیه لنفوبلاست دارند. در ارزیابی هم‌کشت سلول‌های P388D1 و سلول‌های مغز استخوان، تفاوت در آنتی‌ژن‌های سطحی این دو جمعیت سلولی می‌تواند به افتراق آنها کمک کند. هدف از این تحقیق تهیه آنتی‌بادی است که بتوان به وسیله آن سلول‌های P388D1 را از سلول‌های مغز استخوان افتراق داد. </p><p align="justify"><strong>مواد و روش‌ها:</strong> جهت تهیه آنتی‌بادی علیه سلول‌های P388D1 ، ایمن‌سازی خرگوش به وسیله تزریق داخل صفاقی و داخل وریدی این سلول‌ها انجام شد. بعد از خونگیری، ایمونوگلوبولین‌های سرم خرگوش به دفعات متعدد در محلول سولفات آمونیوم رسوب داده شدند. قبل و بعد از رسوب‌دهی، الکتروفورز پروتئین‌های سرم و تعیین مقدار آنها با روش برادفورد انجام شد. آنتی‌بادی‌های دارای واکنش متقاطع با سلول‌های مغز استخوان به وسیله چندین بار عمل جذب توسط سلولهای مغز استخوان حذف شدند. در مراحل مختلف جذب، حضور آنتی‌بادی‌های ضدسلولی با استفاده از روش ایمو نوفلورسانس غیر مستقیم تعیین گردید و قدرت کشندگی آنتی‌بادی‌ها با واسطه کمپلمان نیز مورد ارزیابی قرار گرفت. </p><p align="justify"><strong>یافته‌ها:</strong> محلول آنتی‌بادی جذب شده‌ای که در آزمایشات ایمو نو فلورسانس غیر مستقیم هیچ واکنشی علیه سلول‌های مغز استخوان نشان نمی‌دهد، واجد آنتی‌بادی‌هایی بر علیه سلول‌های P388D1 می‌باشد که قادر به کشتن با واسطه کمپلمان این سلول‌ها می‌باشند. </p><p align="justify"><strong>نتیجه‌گیری و توصیه‌ها:</strong> آنتی‌بادی‌های تهیه شده در این تحقیق را می‌توان به منظور تعیین جمعیت سلول‌های P388D1 یا حذف این سلول‌ها ازجمعیت سلول‌های مغز استخوان استفاده نمود. </p> <p align="justify"><strong>Background: </strong>Co-culture techniques have important role in the study of cellular interactions. The ability of distinguishng co-cultured cells facilitates evaluation of these cultures. P388D1 cells are macrophage like cells but morphologic appearance of these cells is like lymphoblasts. In evaluation of P388D1 and bone marrow cells co-culture, Different antigens on P388D1 cells surface could help to distinguish these cells from bone marrow cells. </p><p align="justify"><strong>Materials and Methods </strong>: In order to prepare the antibody against P388D1 cells, rabbits were immunized by intraperitoneal and intravenous injections of these cells. After getting blood, serum immunoglobulins were precipitated in ammonium sulfate solution. Before and after each precipitation, serum protein electrophoresis was performed and protein was assayed by Bradford method. Antibodies, which had a cross reactivity with bone marrow cells were removed by several absorptions with bone marrow cells. The presence of antibodies on cell surface was detected by indirect immunoflurescence labeling technique. Complement mediated cytotoxicity of antibodies was also assayed. </p><p align="justify"><strong>Results: </strong>The results indicate that this antibody solution has no detectable cross reaction with bone marrow cells, using indirect immunflurescence labeling technique, while it has positive reaction against P388D1 cells. </p><p align="justify"><strong>Conclusion: </strong>By means of these antibodies we would be able to recognize or remove P388D1 cells from bone marrow cell population. </p> سلولهای P388D1، آنتی بادی P388D1 cells, Macrophage, Antibody 6 14 http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-172&slc_lang=fa&sid=1 Mortaza Salimian مرتضی سلیمیان salimian@kaums.ac.ir 29003194753284600940 29003194753284600940 Yes Zahra Soheili زهرا سهیلی 29003194753284600941 29003194753284600941 No Bahram Goliaei بهرام گلیایی 29003194753284600942 29003194753284600942 No