fa ردیابی کمی توکسوپلاسما گوندیی توسطReal-time PCR با استفاده از پروب Molecular beacon در موش صحرایی medicine, paraclinic medicine, paraclinic پژوهشي Research <p><strong>سابقه و هدف:</strong> روش کمی Real time PCR روشی سریع و دارای حساسیت و ویژگی بالایی در تشخیص توکسوپلاسموزیس است. هدف از پژوهش حاضر ارزیابی این روش با استفاده از ژن B1 برای تشخیص توکسوپلاسموزیس در آلودگی تجربی موش صحرایی با انگل مذکور است. </p><p style="DIRECTION: rtl"><strong>مواد و روش ها:</strong> انگل در محوطه صفاقی موش سوری تکثیر شده و DNA آن از مرحله تاکی زوئیت استخراج گردید. سپس با استفاده از روش PCR ژنB1 تکثیر گردیده و با تکنیک Real time PCR و پروب Molecular beacon مورد شناسایی قرار گرفت. در نهایت تعدادی موش صحرایی‌ به‌صورت تجربی آلوده شده و انگل در خون آنها به صورت کمی ردیابی شد. </p><p><strong>نتایج:</strong> ژن B1 توکسوپلاسما گوندی با موفقیت تکثیر شده و باندی حدود 116 جفت بازی را تولید نمود. این ژن برای استفاده در روش Real time PCR جهت ردیابی کمی انگل بسیار مناسب ارزیابی گردید. </p><p><strong>نتیجه گیری:</strong> ارزیابی تکنیک Real time PCR نشان داد که این روش برای تشخیص ژنB1 سریع و حساس بوده و جهت ارزیابی کمی توکسوپلاسما در خون موش صحرایی بسیار مناسب است. </p> <p><strong>Background:</strong> Application of quantitative real time PCR has evolved as a sensitive, specific, and rapid method for the detection of Toxoplasma gondii (T. gondii). The present study aimed to evaluate the efficacy of real time PCR method, using B1 gene, for the diagnosis of toxoplasmosis in the experimentally infected rats. </p><p><strong>Materials and Methods:</strong> Parasites were cultured in peritoneal cavity of mice and then the DNA was extracted in tachyzoite stage. The B1 gene of T. gondii was amplified by PCR and detected by real time PCR method based on the molecular beacon probe. Finally, real time PCR was evaluated for the quantization of T. gondii in the blood of the experimentally infected rats. </p><p><strong>Results:</strong> The B1 gene of T. gondii which was successfully amplified by PCR yielded an amplicon with an approximate length of 116 bp. Using this gene was evaluated highly appropriate for the quantization of T. gondii by real time PCR method. </p><p><strong>Conclusion:</strong> Application of real time PCR method is shown to be highly efficient in terms of sensitivity and rapidity for the detection of B1 gene as well as the quantization of T. gondii in blood of rat. </p> توکسوپلاسما گوندی، روش Real-time PCR، ژن B1، موش صحرایی Toxoplasma gondii, Real time PCR, B1 gene, Rat 311 316 http://feyz.kaums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-831-6&slc_lang=fa&sid=1 Roghayeh Norozi رقیه نوروزی 290031947532846008317 290031947532846008317 No Abdolhossein Dalimi-Asl عبدالحسین دلیمی اصل dalimi_a@modares.ac.ir 290031947532846008318 290031947532846008318 Yes Tarbiat Modares University دانشگاه تربیت مدرس Mahdi Forozandeh-Moghadam مهدی فروزنده مقدم 290031947532846008319 290031947532846008319 No Fatemeh Ghaffarifar فاطمه غفاری فر 290031947532846008320 290031947532846008320 No