[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 13، شماره 3 - ( فصلنامه 1388 ) ::
جلد 13 شماره 3 صفحات 174-179 برگشت به فهرست نسخه ها
استخراج و ارزیابی مولکولی پروتئین های عمده غشای خارجی بروسلا آبورتوس S99
سحر کرمی، سید داور سیادت* ، بهمن تبرایی، داریوش نوروزیان، ناصر هرزندی، محمد رضا آقا صادقی، محمد رضا رضوی، سید مهدی سادات، علی شریفات سلمانی، مهدی نجاتی
استاديار انستیتو پاستور ایران ، d.siadat@gmail.com
چکیده:   (7956 مشاهده)

خلاصه

سابقه و هدف: بروسلا باکتری گرم منفی، کوکوباسیل، هوازی، درون سلولی اختیاری، غیرمتحرک و فاقد اسپور می باشد. که طیف گسترده ای از حیوانات و همچنین انسان را آلوده می نماید. امروزه پروتئین های غشای خارجی (OMPs) بروسلا به عنوان ساختارهای ایمونو‍‍ژنیک جهت طراحی و تولید واکسن زیر واحدی برای پیشگیری از بروسلوزیس انسانی مورد توجه قرار گرفته اند.

مواد و روش ها: پروتئین های عمده غشای خارجی از سویه صاف بروسلا آبورتوسS99 از سلول‌های سونیکه شده به واسطه اولتراسانتریفیگاسیون و پیش هضم آنزیمی با لیزوزیم، استخراج و به وسیله کروماتوگرافی تبادل یونی و ژل فیلتراسیون به طور خالص تخلیص شدند. مقدار کل پروتئین تخلیص شده توسط دستگاه نانودراپ اندازه گیری شد. با استفاده از SDS–PAGE، پروفایلی از پروتئین های غشاء خارجی بروسلا آبورتوس S99 به دست آمد که براساس وزن مولکولی از یکدیگر تفکیک شدند. در الگوی الکتروفورتیکی به دست آمده، پورین‌ها تخلیص شدند. در نهایت آزمون پیروژنی و سمیت غیر نرمال طبق پروتکل سازمان بهداشت جهانی روی نمونه‌های تخلیص شده انجام شد.

نتایج: غلظت پروتئین های عمده غشای خارجی استخراج شده در این مطالعه برابر mg/ml 27/6 بود که با توجه به الگوی الکتروفورتیک به دست آمده از SDS–PAGE، وزن مولکولی نمونه استخراج شده در محدوده ی 36-38 کیلودالتون می باشد. بر اساس وزن مولکولی محاسبه شده، این پروتئین ها در گروه پورین ها قرار می گیرند. نتیجه ی آزمون پیروژنی و سمیت غیر نرمال روی نمونه‌ها منفی بود.

نتیجه گیری: روش به کار رفته در این مطالعه به منظور تخلیص پروتئین های عمده غشای خارجی بروسلا آبورتوس S99 با غلظت بالا روشی مناسب و کارآمد بوده و با استفاده از این روش، پورین های باکتری به صورت اختصاصی قابل استخراج می باشند. نتیجه ی آزمون پیروژنی و سمیت غیر نرمال بی‌زیانی مصرف آنها را در مدل‌های حیوانی و مصارف انسانی تایید می‌نماید.

واژه‌های کلیدی: بروسلا آبورتوس، پروتئین های غشای خارجی باکتریایی، ارزیابی مولکولی
متن کامل [PDF 176 kb]   (2282 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: عمومى
دریافت: ۱۳۸۸/۸/۲۰
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Karami S, Siadat S D, Tabaraie B, Norouzian D, Harzandi N, Aghasadeghi M R, et al . Extraction and molecular determination of major outer membrane proteins of Brucella abortus S99. Feyz. 2009; 13 (3) :174-179
URL: http://feyz.kaums.ac.ir/article-1-779-fa.html

کرمی سحر، سیادت سید داور، تبرایی بهمن، نوروزیان داریوش، هرزندی ناصر، آقا صادقی محمد رضا، و همکاران. و همکاران.. استخراج و ارزیابی مولکولی پروتئین های عمده غشای خارجی بروسلا آبورتوس S99 . دوماه نامه علمي ـ پژوهشي فيض. 1388; 13 (3) :174-179

URL: http://feyz.kaums.ac.ir/article-1-779-fa.html



دوره 13، شماره 3 - ( فصلنامه 1388 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علمی پژوهشی فیض ::: دانشگاه علوم پزشکی کاشان KAUMS Journal ( FEYZ )
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3752