سابقه و هدف: Inhibin پروتئینی است که در پاسخ به اثر FSH توسط سلولهای گرانولوزا و سرتولی ترشح میشود و باعث کنترل ترشح FSH از هیپوفیز قدامی میگردد. ارزیابی این پروتئین نقش ارزندهای در آگاهی از وضعیت باروری در زنان و همچنین پیشآگهی از ابتلای جنین به سندروم داون و پرهاکلامپسی دارد. اندازهگیری غلظت Inhibin در ارزیابی وضعیت باروری مردان نیز دارای اهمیت میباشد. تا کنون روشهای مختلف و طولانی برای تخلیص Inhibin معرفی گردیده است. هدف از این تحقیق خالصسازی Inhibin از مایع فولیکولی با روش ایمونوافینیتی میباشد.
مواد و روش ها: مایع فولیکولی جمعآوری شده از زنان مراجعهکننده به مرکز درمانی ابنسینا، پس از فیلتراسیون توسط محلول سولفات آمونیوم اشباع، تغلیظ گردید. جهت جداسازی Inhibin ، از روش ایمونوافینیتی بر روی ستون کروماتوگرافی جذبی به کمک آنتیبادی تکدودمانی علیه Inhibin استفاده شد . پس از عبور مایع فولیکولی از ستون کروماتوگرافی جذبی ، محلول پروتئینی به دست آمده به کمک روش SDS-PAGE و وسترن بلات ارزیابی شد.
نتایج: وجود تک باند 32 کیلودالتونی بعد از رنگآمیزی نقره موید حضور Inhibin بود. نتیجهی آزمون وسترن بلات نشاندهندهی شناسایی اپیتوپ توسط آنتیبادی علیه Inhibin میباشد. راندمان ستون در جداسازی Inhibin با استفاده از روش کروماتوگرافی افینیتی 92 درصد میباشد.
نتیجهگیری : این روش در مقایسه با بسیاری از روشهای بیوشیمیایی از راندمان بالایی برخوردار میباشد. با این حال به دلیل عدم دسترسی به مایع فولیکولی انسان در حجم انبوه، تخلیص Inhibin توسط روش ذکر شده در این مقاله بیشتر برای کاربردهای آزمایشگاهی در مقادیر کم بوده و در مقادیر انبوه تولید Inhibin نوترکیب توصیه میشود.