[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 20، شماره 2 - ( دوماه نامه 1395 ) ::
جلد 20 شماره 2 صفحات 157-164 برگشت به فهرست نسخه ها
اثرات غلظت های مختلف ساکاروز و سرم جنین گوساله بر زنده‌ مانی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی بره قبل و بعد از انجماد
علی اصغر مقدم، پیمان رحیمی فیلی ، زهرا نیکوصفت، سجاد ضرغامی
استادیار گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه ، peymanrahimi@razi.ac.ir
چکیده:   (1326 مشاهده)

سابقه و هدف: سلول­ های بنیادی اسپرماتوگونی کاربردهای فراوانی در طب تولید مثلی و زیست­فناوری دارند. جهت نگهداری طولانی­مدت این سلول­ ها از تکنیک انجماد استفاده می­ شود. هدف از مطالعه حاضر، بررسی تاثیر غلظت­ های مختلف FBS و ساکاروز روی درصد حیات اسپرماتوگونی بره بود.

مواد و روش ­ها: سلول­ های بیضه­ بره های نابالغ با روش هضم آنزیمی دو مرحله­ ای استخراج شده و با حذف تمایزی خالص­سازی گردید. سپس، سلول­ ها به 6 گروه آزمایشی تقسیم بندی شدند. در گروه­ های 1، 2 و 3 از FBS با غلظت 10 درصد و از ساکاروز به­ ترتیب با غلظت­ های 0/07، 0/14 و 0/21 مولار و در گروه­ های 4، 5 و 6 از FBS با غلظت 20 درصد و از ساکاروز به­ ترتیب با غلظت ­های 0/07، 0/14 و 0/21 مولار استفاده شد. درصد حیات سلول­ ها در گروه ­های مختلف آزمایشی در سه مرحله مختلف (بلافاصله پس از استخراج، متعاقب افزودن محیط انجماد و پس از یخ­گشایی) مورد سنجش قرار ­گرفت. جهت شناسایی سلول‌‌های اسپرماتوگونی تیپ A از رنگ‌آمیزی ایمنوسیتوشیمی علیه PGP9.5 استفاده شد.

نتایج: نتایج این مطالعه نشان می ­دهد مواد محافظ در برابر انجماد اثرات سمی روی اسپرماتوگونی بره ندارند. هم ­چنین، درصد زنده­مانی این سلول­ ها در محیط حاوی 10 درصد FBS به­ طور معنی ­داری بیشتر از درصد زنده ­مانی آنها در محیط حاوی 20 درصد FBS بود. علاوه بر این، افزایش غلظت ­های ساکاروز (0/07، 0/14 و 0/21) تاثیر مثبتی روی درصد زنده­ مانی اسپرماتوگونی نداشت.

نتیجه ­گیری: در مجموع به ­نظر می­رسد استفاده از محیط انجماد حاوی 10 درصد DMSO توام با 10 درصد FBS و 0/07 مولار ساکاروز برای انجماد  اسپرماتوگونی بره مناسب است.

واژه‌های کلیدی: اسپرماتوگونی بره، انجماد، ساکاروز، سرم جنین گاو، PGP9.5
متن کامل [PDF 265 kb]   (403 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: medicine, paraclinic
دریافت: ۱۳۹۵/۳/۳۰ | پذیرش: ۱۳۹۵/۳/۳۰ | انتشار: ۱۳۹۵/۳/۳۰
فهرست منابع
1. De Rooij DG, Grootegoed JA. Spermatogonial stem cells. Curr Opin in Cell Biol 1998: 10(6): 694-701.
2. Lok D, Weenk D, De Rooij DG. Morphology, proliferation, and differentiation of undifferentiated spermatogonia in the Chinese hamster and the ram. Anat Rec 1982; 203(1): 83-99.
3. Izadyar F, Den Ouden K, Stout TA, Stout J, Coret J, Lankveld DP, et al. Autologous and homologous transplantation of bovine spermatogonial stem cells. Reproduction 2003; 126(6): 765-74.
4. Dann CT, Alvarado AL, Molyneux LA, Denard BS, Garbers DL, Porteus MH. Spermatogonial stem cell self-renewal requires OCT4, a factor downregulated during retinoic acid-induced differentiation. Stem Cells 2008: 26(11): 2928-37.
5. Oatley JM, Oatley MJ, Avarbock MR, Tobias JW, Brinster RL. Colony stimulating factor 1 is an extrinsic stimulator of mouse spermatogonial stem cell self-renewal. Development 2009: 136(7): 1191-99.
6. Oatley JM, Avarbock MR, Brinster RL. Glial cell line-derived neurotrophic factor regulation of genes essential for self-renewal of mouse spermatogonial stem cells is dependent on Src family kinase signaling. J Biol Chem 2007: 282(35): 25842-51.
7. Dym M, Kokkinaki M, He Z. Spermatogonial stem cells: mouse and human comparisons. Birth Defects Res C Embryo Today 2009: 87(1): 27–34.
8. Honaramooz A, Behboodi E, Blash S, Megee SO, Dobrinski I. Germ cell transplantation in goats. Mol Reprod Dev 2003; 64(4): 422-28.
9. Kubota H, Brinster RL. Culture of rodent spermatogonial stem cells, male germline stem cells of the postnatal animal. Methods Cell Biol 2008; 86: 59-84.
10. Kanatsu-Shinohara M, Ogonuki N, Inoue K, Miki H, Ogura A, Toyokuni S, et al. Long-term proliferation in culture and germline transmission of mouse male germline stem cells. Biol Reprod 2003: 69(2): 612-16.
11. Izadyar F, Spierenberg GT, Creemers LB, den Ouden K, de Rooij DG. Isolation and purification of type A spermatogonia from the bovine testis. Reproduction 2002: 124(1): 85-94.
12. Hill JR, Dobrinski I. Male germ cell transplantation in livestock. Reprod Fertil Dev 2006: 18(1-2) 13-8.
13. Meachem S, von Schonfeldt V, Schlatt S. Spermatogonia: stem cells with a great perspective. Reproduction 2001; 121(6): 825-34.
14. Zeisberger SM, Schulz JC, Mairhofer M, Ponsaerts P, Wouters G, Doerr D, et al. Biological and physicochemical characterization of a serum- and xeno-free chemically defined cryopreservation procedure for adult human progenitor cells. Cell Transplant 2011; 20(8):1241-57.
15. Yang PF, Hua TC, Tsung HC, Cheng QK, Cao YL. Effective Cryopreservation of Human Embryonic Stem Cells By Programmed Freezing. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc 2005; 1(1): 482-5.
16. Friedler S, Giudice LC, Lamb EJ. Cryopreservation of embryos and ova. Fertil Steril 1988; 49(5): 743- 64.
17. Yang Y, Steeg J, Honaramooz A. The effects of tissue sample size and media on short-term hypothermic preservation of porcine testis tissue. Cell Tissue Res 2010: 340(2): 397-406.
18. Lee YA, Kim YH, Ha SJ, Kim BJ, Kim KJ, Jung MS, et al. Effect of sugar molecules on the cryopreservation of mouse spermatogonial stem cells. Fertil Steril 2014; 101(4): 1165-75.
19. Lee YA, Kim YH, Kim, BJ, Jung MS, Auh JH, Seo JT, et al. Cryopreservation of mouse spermatogonial stem cells in dimethylsulfoxide and polyethylene glycol. Biol Reprod 2013; 89(5): 109.
20. Van Pelt AM, Morena AR, Van Dissel Emiliani FM, Boitani C, Gaemers IC, De Rooij DG, et al. Isolation of the synchronized a spermatogonia from adult vitamin A-deficient rat testes. Biol Reprod 1996; 55(2): 439-44.
21. Heidari B, Rahmati-Ahmadabadi M, Akhondi MM, Zarnani AH, Jeddi-Tehrani M, Shirazi A, et al. Isolation, identification, and culture of goat spermatogonial stem cells using c-kit and PGP9.5 markers. J Assist Reprod Genet 2012; 29(10) 1029-38.
22. Janat-Alipoor F, Sadighi Gilani, Eftekhari-Yazdi, Daneshzadeh MT, Khakzad H. The Effect of FBS Concentration on Cryopreservation of Isolated Spermatogonial Cells from Neonatal Mouse by MACS Method. J Iran Anat Sci 2010; 7(28-29): 113-20. [in Persian]
23. Orief Y, Schultze-Mosgau A, Dafopoulos K, Al-Hasani S. Vitrification: will it replace the conventional gametecryopreservation techniques? Middle East Fertil Soc J 2005: 10(3): 171-84.
24. Huang J, Li Q, Zhao R, Li W, Han Z, Chen X, et al. Effect of sugars on maturation rate of vitrified-thawed immature porcine oocytes. Anim Reprod Sci 2008; 106(1-2): 25-35.
25. Fahy GM, MacFarlane DR, Angell CA, Meryman HT. Vitrification as an approach to cryopreservation. Cryobiology 1984; 21(4): 407-26.
26. Kaul G, Kaur J, Rafeeqi TA. Ultrasound Guided Transplantation of Enriched and Cryopreserved Spermatogonial Cell Suspension in Goats. Reprod Domest Anim 2009; 45(6): 249-54.
27. Jain J, Paulson RJ. Oocyte cryopreservation. Fertil Steril 2006; 86(4 Suppl): 1037-46.
28. Sutton RL. Critical cooling rates for aqueous cryoprotectants in the presence of sugars and polysaccharides. Cryobiology 1992; 29(5): 585-98.
29. Kasai M, Mukaida T. Cryopreservation of animal and human embryos by vitrification. Reprod Biomed Online 2004: 9(2): 164-7.
30. Redden E, Davey R, Borjigin U, Hutton K, Hinch G, Hope S, et al. Large quantity cryopreservation of bovine testicular cells and its effect on enrichment of type a spermatogonia. Cryobiology 2009; 58(2): 190-95.
31. Rahimi-Feyli P, Tajik P, Shafiei Sh, Dodel M, Arbabi F. The effect of poly L-lactic acid nanofiber on the induction of colony formation of frozen-thawed bovine spermatogonial stem cells in vitro. Feyz 2015: 19(1): 15-23. [in Persian]
32. Wang P, Li Y, Hu XC, Cai XL, Hou LP, Wang YF, et al. Cryoprotective effects of low-density lipoproteins, trehalose and soybean lecithin on murine spermatogonial stem cells. Zygote 2014; 22(2): 158-63.
33. Abrishami M, Anzar M, Honaramooz A. Cryopreservation of immature porcine testis tissue to maintain its developmental potential after xenografting into recipient mice. Theriogenology 2010; 73(1): 86–9.
34. Wu J, Hu T, Guo B, Yue Z, Yang Z, Zhang X. Cryopreservation of adult bovine testicular tissue for spermatogonia enrichment. Cryo Letters 2011; 32(5): 402-9.
35. Yasuhiro K, Daiji E, Toshihiko I. Expression of protein gene product 9.5, a neuronal ubiquitin C-terminal hydrolase, and its developing change in sertoli cells of mouse testis. Mol Reprod Dev 1999; 54(4): 333–41.
36. Zhang Z, Hill J, Holland M, Kurihara Y, Loveland KL. Bovine sertoli cells colonize and form tubules in murine hosts following transplantation and grafting procedures. J Androl 2008; 29(4): 418–30.
37. Rodriguez-Sosa JR, Dobson H, Hahnel A. Isolation and transplantation of spermatogonia in sheep. Theriogenology 2006; 66(9): 2091-103.
38. Von Kopylow K, Kirchhoff C, Jezek D, Schulze W, Feig C, Primig M. Screening for biomarkers of spermatogonia within the human testis: a whole genome approach. Hum Reprod 2010; 25(5): 1104–12.
39. Zeng W, Avelar GF, Rathi R, Franca LR, Dobrinski I. The length of the spermatogenic cycleis conserved in porcine and ovine testis xenografts. J Androl 2006; 27(4): 527-33.
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

کد امنیتی را در کادر بنویسید >


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Moghaddam A A, Rahimi-Feyli P, Nikousefat Z, Zarghami S. Effects of different concentrations of sucrose and fetal bovine serum on viability rate of lamb spermatogonial stem cells before and after cryopreservation. Feyz. 2016; 20 (2) :157-164
URL: http://feyz.kaums.ac.ir/article-1-3041-fa.html

مقدم علی اصغر، رحیمی فیلی پیمان، نیکوصفت زهرا، ضرغامی سجاد. اثرات غلظت های مختلف ساکاروز و سرم جنین گوساله بر زنده‌ مانی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی بره قبل و بعد از انجماد. دوماه نامه علمي ـ پژوهشي فيض. 1395; 20 (2) :157-164

URL: http://feyz.kaums.ac.ir/article-1-3041-fa.html



دوره 20، شماره 2 - ( دوماه نامه 1395 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علمی پژوهشی فیض ::: دانشگاه علوم پزشکی کاشان KAUMS Journal ( FEYZ )
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3660